脐带血血红蛋白电泳联合基因检测β-珠蛋白生成障碍性贫血的诊断价值 A

摘要：目的探讨脐带血血红蛋白(Hb)电泳在早期辅助诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血的临床价值。方法共收集南宁地 区父母双方均为珠蛋白生成障碍性贫血携带者产前诊断的胎儿脐带血1 599例，所有标本均确诊。采用Sebia全自动毛细管电泳系统对脐带血进行Hb电泳组分检测。结果共检出p_珠蛋白生成障碍性贫血携带者186例，其中重型68例。使用ROC曲线分析Hb A值对p一珠蛋白生成障碍性贫血携带者和中重型的诊断结果，携带者佳截断值为5.15%，敏感性83.9%，特异性 82. 3%；中重型者佳截断值为3.2%，敏感性100.0%，特异性99.4%。结论脐带血Hb A值可有效辅助诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血。

关键词：脐带血；血红蛋白电泳；产前诊断；珠蛋白生成障碍性贫血
The value of combined tests of hemoglobin electrophoresis and genetic

testing in neonatal cord blood screening for P-thalassemia
LIN //,CHEN Qiuli,WEI Yuan ,CHEN Biyan,WANG Liang,HE Sheng
(Department o f Genetic and me[x]tabolism ,Maternal and Children Health Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region,Nanning,Guangxi 530003,China)
Abstract:ob[x]jective To explore the clinic utility of Hb A level in neonatal cord blood screening for β-thalassemia. Methods A
total of 1 599 neonatal cord specimens whose parents were carriers of p-thalassemia prenatal diagnosised by routine molecular genetic were collected by cordocentesis. These samples were analyzed by the capillary electrophoresis system (Sebia). Results Among1599 fetuses,186 were diagnosed as β-thalassemia carriers,68 were β-thalasseima intermedia/major. ROC analysis demonstrated that the optimal cutoff value for identifying β-thalassemia carrier from the Hb A level was 5.15% (sensitivity - 83. 9%,specificity= 82. 3%) ,and that was 3. 2% for β-thalasseima intermedia/major ( sensitivity= 100. 0 % , specificity= 99.4%). Conclusion The Hb A level of cord blood was an effective marker to screen the β-thalassemia for fetuses and is therefore well-suited for clinical diagnostic use.
Keywords:cordblood; hemoglobinelectrophoresis; prenataldiagnosis; thalasemia
珠蛋白生成障碍性贫血是珠蛋白基因表达降低或缺失造 成的一种常见的遗传溶血性疾病，根据受累基因的不同可分为a-、β-珠蛋白生成障碍性贫血，其中约90%的a-珠蛋白生成障碍性贫血是由大片段缺失突变造成，约90%β-珠蛋白生成障碍性贫血是由点突变造成，广西地区β-珠蛋白生成障碍性贫血基因携带率为6.43%[1-2]。目前有872种突变已确认可导致 β-珠蛋白生成障碍性贫血，其基因型分类有助于调整佳治疗 方案，判断预后及遗传咨询，其中大多数中重型患儿出生后3～6个月出现临床症状[3-4]。早期快速筛查对该病的预防控制 有重要意义。我国中重型β-珠蛋白生成障碍性贫血患儿的出生预防主要是依靠对高风险夫妇的筛查及产前诊断，产前诊断 的方式主要采集绒毛（孕8～12周），羊水（孕14～24周），脐带 血（>23孕周）提取DNA后，常规PCR实验确诊，存在母血污 染及漏检风险[5]。近年来，胎儿脐带血血红蛋白( Hb)分析作 为一种快速、灵敏的方法可作为珠蛋白生成障碍性贫血的辅助 筛查方法应用于临床，特别是基因诊断未普及地区及父母基因 型未知的胎儿[6]。采用毛细管电泳筛查脐带血Hb联合基因检测，辅助产前诊断a-珠蛋白生成障碍性贫血，但β-珠蛋白生成障碍性贫血相关脐带血电泳组分的研究较少[7-8]。现探讨脐 带血电泳产前筛查在辅助诊断p-珠蛋白生成障碍性贫血的临床价值，报道如下。

1资料与方法

1.1 -般资料 收集2013年1月至2015年1z月南宁地区 父母双方均为珠蛋白生成障碍性贫血携带者，产前诊断且孕周 为24～28周的胎儿脐带血1 599例。 
1.2方法 脐静脉穿刺抽取1～2 mL脐带血，枸橼酸钠抗凝。采用gap-PCR法检测联合反向点杂交对常见6种a-珠蛋白生成障碍性贫血及17种β-珠蛋白生成障碍性贫血进行基因诊断，罕见珠蛋白生成障碍性贫血及异常Hb进行Sanger测 序，确定其基因型。使用Capillarys 2全自动毛细管电泳仪(法 国Sebia)进行脐带血电泳组分分析。

1.3统计学处理 采用SPSS13.O统计软件进行数据分析， 并对各组Hb A值统计分析。组间比较实用t检验，应用受试者工作特征(ROC)曲线分析Hb A值的筛查效率，经比较优选佳截断值[9]。P<0.05为差异有统计学意义。

2结 果

 2.1 脐带血β-珠蛋白生成障碍性贫血基因型分布结果 1 599例脐带血标本经基因诊断后，正常组337例，p．珠蛋白生成障碍性贫血携带者186例，其中中重型68例。p_珠蛋白 生成障碍性贫血携带者以βCD41-42/βN、βCD17/βN为常见，其频率分别为4.62%、3.75%。见表1。