动物模型是进行转化医学研究的重要工具。本文拟介绍一种胰腺癌严重联合免疫缺陷( SCID)小鼠移植瘤模型的建立方法。
一、材料与方法
1.实验动物:采用5~6周龄的雌性SCID小鼠,饲养于无特定病原体( SPF)条件。
2.肿瘤组织接种:取得肿瘤组织后,剪成10~ 15 mm3的小块;将总体积50mm3的肿瘤组织与30~50μl的Matrigel(354248,Coming公司)混合;从小鼠一侧腰胁部靠近大腿处
戳入肿瘤植入针,在小鼠皮下朝腋窝方向行针,待针头行至离腋窝1 cm处、即小鼠肩胛区,将肿瘤组织推入小鼠皮下。
3.移植瘤的监测、传代:成瘤后每4d测量小鼠体重,测量肿瘤的长、宽,并通过以下公式计算肿瘤体积:肿瘤体积=(长×宽2)/2;待移植瘤体积长至500 N1000mm3时进行传
代。
4.统计学方法:应用SPSS 20.0统计软件分析,计量资料采用配对t检验,以P<0. 05为差异有统计学意义。
二、结果
12例胰腺癌进行接种,各接种2~3只小鼠,成瘤者10例,平均成瘤率为83. 33%。所有Fl代成瘤的肿瘤均成功传至F2、F3代(各5只小鼠)。Fl代肿瘤的平均成瘤时间为(62±25)d,F2代肿瘤的平均成瘤时间为(47 +17)d,F3代肿瘤的平均成瘤时间为(33 +8)d,各代之间平均成瘤时间的差异有统计学意义(P=0. 019)。
三、讨论
与裸鼠比较,SCID小鼠因同时存在B淋巴细胞功能缺陷,其免疫缺陷情况更为严重,是移植瘤更好的受体,国内外多采用裸鼠作为荷瘤鼠,与之比较SCID小鼠在成瘤率和成瘤时间上均有优势[1]。通过标准化的实验流程及SCID小鼠的应用,我们建立了10例胰腺癌组织皮下移植瘤模型,具备高成瘤率、少成瘤时间和可重复性的特点,可在此基础上进一步开展药效、药敏的进一步研究。
参考文献
[1] Rubio-Viqueira B,Jimeno A,Cusatis G,et al.An in vivo platform for translational drug development in pancreatic cancer[J].Clin Cancer Res,2006,12(15):46524661. DOI:10. 115 8/1078 -0432. CCR-06 -0113.