大自血操作步骤：

1. 取血

利用输血器械从手臂静脉血管中抽取100毫升血液至一次性真空无菌反应血袋中。抽取的血液与血袋中的抗凝剂相混合，防止血液凝结。

2.混合臭氧

然后通过一根注射器抽取100ml的臭氧掺入血液中。血液与臭氧的比例为1：1，臭氧浓度为47微克/ml以缓慢的圆周运动将血液-臭氧混合物振动大约1分钟：血液由此变为鲜红色的含氧血。

3.回输血液

通过静脉注射将血液重新输回血管，年老者及心功能不全者宜调慢滴速（50滴/分钟左右）。臭氧疗法医生协会建议在静脉注射时使用生理盐水溶液等。臭氧剂量的选择由所治疗的疾病类型决定

臭氧大自血免疫疗法护理要求：
1、 心理护理
臭氧大自血疗法是一种新的疗法，与传统的静脉输液、输血等有很大不同，许多患者没有这方面的知识，初次治疗时患者存在不同程度的恐惧、紧张、对治疗不了解、怀疑的心理等。另外，因为疗程长，患者缺乏耐心，个别患者看到粗大针头会紧张等，护理人员应向患者做好心理疏导，向他们讲解有关臭氧治疗的原理、方法、意见及配合治疗的注意事项，消除其紧张、恐惧感，取得患者的配合。
2、饮食护理
鼓励清醒病人与操作前尽量多进食及饮水多保证机体有足够的血容量，少食或不食含油脂的食物，防止血液粘稠导致阻塞针头致操作失败。
3、技术护理
臭氧治疗过程中严格遵守操作规程，并发症较少，操作前（采血前）首先做好解释工作，常规测血压、脉搏、呼吸、心率，采血过程中不断观察病人神志、神态，有无心慌、出冷汗和面部苍白、恶心等症状，如出现上述症状可缓慢采血或报告医师是否停止采血。自血回输治疗过程中应根据个体情况调节滴注速度，如出现口唇发麻症状，告诉患者是属于正常现象，输血结束后症状会减轻或消失，如出现心慌、气促、面色苍白、出冷汗和恶心等症状，立即停止输血并给予吸氧。输血治疗结束，应嘱咐患者按压穿刺部位10min以上，凝血酶原时间延长者应按压更长时间，以免出血。为减轻病人痛苦及看到大针头有恐惧心理，应提高穿刺成功率，尽量一次采血成功。
4、严格执行无菌技术操作及查对制度
大自血治疗是集采血、输血和氧合血液为一体的一种临床治疗技术，每一个环节对无菌技术要求是非常严格的，故要严格遵守无菌技术操作原则。