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干细胞研究新趋势

文章来源:健康界发布日期:2022-08-11浏览次数:62

干细胞是一组可以自我更新并具有多种分化能力的细胞。2012年诺贝尔生理学或医学奖得主山中伸弥于 2006 年实现了将体细胞转化为多能干细胞的方法,自此拉开了干细胞治疗的序幕。

干细胞的发育受多种内在机制和微环境因素的影响。根据分化潜能,干细胞可分为全能干细胞(如:受精卵),多能干细胞(如:胚胎干细胞)和单能干细胞(如:神经干细胞)。

目前干细胞的临床应用可概括为四个方面:疾病模型研究、再生治疗、药物开发、干细胞靶向治疗[1]。

从上世纪60年代以来,研究人员便一直致力于开展干细胞治疗的研究,并相继在帕金森病、亨廷顿病、杜氏肌营养不良症、范可尼贫血和甲型血友病等疾病上取得了一定的成功。干细胞治疗的另一种策略是激活成体干细胞的增殖和分化潜能,例如改变促红细胞生成素祖细胞的活性。

此外,干细胞还可以构建特定的疾病模型,在疾病研究和新药开发中具有广阔的应用前景。这些疾病模型包括肿瘤、心血管疾病和神经系统疾病。这些疾病模型主要由诱导多能干细胞(iPSC)完成。近年来,随着iPSC技术逐渐成熟,研究人员可以基于不同的多能人类干细胞建立疾病/患者特异性模型,探究人类疾病机制和开发治疗性药物。

前文我们已经讲到干细胞构建疾病模型的巨大优势,而构建完成的疾病模型又在药物临床前研究中具有重要的意义。其可以模拟药物在体内的吸收、分布、代谢、利用的情况,有利于评估药物的药理作用、药物在体内的药代动力学和临床疗效[3]。

干细胞在筛选药物先导、测试候选药物的功效和安全性以及选择患者群体进行临床测试方面具有许多得天独厚的优势,并可以大大降低药物研发的成本和周期。

作为一名科研人员,我们应当如何把握住这炙手可热的“超级热点”呢?

俗话说得好:工欲善其事,必先利其器!一项好的研究展开或者临床应用开发是离不开基础的科研条件,包括且不限于高的仪器支持、良好的试剂供应、科学合理的实验方案制定等等。

体细胞编程

InvitrogenCytoTune-iPS 2.0重编程系统(A16517

该系统基于复制缺陷型仙台病毒(SeV)的载体,安全且高效地导入并表达一些关键的遗传基因,它们是将体细胞重编程为iPSC所必需的。多种细胞经验证,如成纤维细胞、PBMCs、CD34+细胞、T细胞、微血管内皮细胞、尿细胞、羊水细胞、骨骼肌成肌细胞等。此外,CTS™ CytoTune-iPS 2.1 仙台病毒重编程试剂盒—无缝转移至临床培养(Elife, 2022)[7]。

体外培养扩增

Essential 8 培养基第一款商业化的E8培养基,8种确定成分,可支持PSC生长超过50代,同时保持PSC分化为三胚层的能力。

 

Gibco StemFlex™ 培养基 (A3349401) 专为高难度应用开发的干细胞扩增培养基。将单细胞传代后的克隆扩增效率提高达5倍,基因编辑后的细胞复苏速度提高2倍,加速助力您的干细胞研究。[8]。

基因编辑

Invitrogen Neon™电转仪(MPK5000S+Invitrogen Lipofectamine Stem干细胞转染试剂(STEM00008

使用Neon转染系统进行电穿孔或使用Invitrogen Lipofectamine 干细胞转染试剂进行脂质转染,将编辑工具递送到iPSC中。虽然这两种方法都能成功完成基因组编辑,但电穿孔递送基因编辑工具通常编辑效率更高(Molecular Cell, 2022) [9]。

诱导分化

Gibco Neurobasal培养基:为满足神经元培养需求,经过优化,形成了一个完整的基础培养基系统,可以维持神经细胞的长期生长和正常表型;能维持高纯度的神经元培养,而无需星型胶质细胞滋养层。

Gibco B-27™ 添加剂:神经细胞培养的血清替代物,更有其他近10种B-27,满足您干细胞、氧化应激、糖代谢等研究。

Gibco N-2 添加剂:适合胚胎神经和中枢神经系统 (CNS) 祖细胞的血清替代物;用于周围和中枢神经系统原代培养中神经母细胞瘤和有丝分裂后神经元的生长和表达(Advanced Science, 2022) [10]。

分析鉴定

实时荧光定量PCR系统

Supersc[x]ript IV VILO cDNA 合成预混液(11756050

专用于RT-qPCR中进行快速、灵敏、可重复性的cDNA合成。即使对于不纯样本或稀有样本,也能获得出色的灵敏度和cDNA产量,从而保证后续qPCR分析的高效性和可重复性。

Invitrogen PSC免疫细胞化学试剂盒

可实现对hPSC的至多四种主要标志物的图像分析:OCT4、SOX2、SSEA4和TRA-1-60,包括一抗、Alexa Fluor二抗、核DNA染料以及用于优化固定PSC染色的预制缓冲液。试剂盒中的抗体已经过验证,具有高性能和多重分析能力,一次可以同时特异性地评估两种标志物(Biochemical Engineering Journal, 2022) [11]。

Invitrogen 抗体

谈及干细胞鉴定,抗体无疑也是关键工具之一。Invitrogen提供广泛的靶标特异干细胞抗体,经过严格两步法的验证抗体,广泛适用于成像、WB、IHC/IF等应用,更能确保您的结果。不仅如此,作为Alexa Fluor 的发明者,我们还推出信噪比更优的Alexe Fluor Plus二抗,特别对于稀有样本的低丰度靶标检测,助您一次性获取发表级结果[12]。

EVOS智能成像系统

可用于长期活细胞实时成像、孔板扫描和大图拼接,以及多种自动化成像应用,安全、易用、精确、灵活(Nature Microbiology, 2022) [13]。