【检验原理】

硫乙醇酸盐流体培养基营养成分丰富，添加硫乙醇酸钠、葡萄糖为还原剂吸收其中的氧，为厌氧菌生长提供较低的氧化还原电位，刃天青作为氧化还原指示剂可以指示培养基内的含氧程度（有氧时淡红色，无氧时无色）便于无菌检验。

【主要组成成分】

胰蛋白胨15.0 g/L、酵母浸粉5.0 g/L、葡萄糖5.0g/L、L-胱氨酸0.5 g/L、硫乙醇酸钠0.5 g/L、氯化钠2.5 g/L、新配制0.1%刃天青溶液1.0ml/L、琼脂0.75 g/L、纯化水1.0 L；

【储存条件及有效期】

2~25℃、避光储存、有效期6个月；

【样本要求】

1．在样本收集过程中、要做到无菌操作，避免有其它细菌污染。

2．样本取得后要尽快送到化验室，进行检样操作。

3．样本如果不能及时送去检验，应放置到2~8℃冰箱保存。

【检验方法】

1. 准备：稀释液、培养基、实验器具等消毒、灭菌时，应照《中华人民共和国药典》（2015年版）

灭菌法的要求。

2. 接种：打开瓶盖进行严格消毒瓶塞，用无菌纱布或棉球擦去消毒液后，用无菌注射器采集适当

标本，直接用针头刺入瓶塞中心将标本缓慢注入（切不可将空气注入），取出针头后再次严格消

毒瓶塞；或在酒精火焰旁消毒瓶塞后取下瓶塞，将标本加入至瓶内，盖上瓶塞，注意无菌操作。

3. 培养：将接种好的培养基摇匀后作好标识，置于30~35 ℃恒温培养箱中静止培养，逐日观察，

一般观察时间不少于14天，血液制品及全血等一般培养7天（或据实际情况定），以稀释液、

冲洗液代替供试品同法操作，作阴性对照。

【检验方法说明】

根据观察现象，做出相应的处理或报告。例如：出现下列情况之一，则可能染菌：上层液体变混浊；液面或瓶壁出现菌膜；含氧指示层（粉红色）消失或明显变少；血液在短时间（0～36 h）内迅速溶血或凝固成块；产生气体，许多发酵菌可产气，梭菌属会产生大量的气体，出现明显的溶血现象；培养期间血液表层或深层有白色颗粒等。若出现可能染菌现象，应立即转种营养琼脂或血琼脂培养进行确证。厌氧菌的确证培养需要在厌氧培养箱中进行。在培养的中后期，分层处可能有少量絮状物系供试品蛋白质变性所引起的正常现象，不作有菌判断；若培养期间上层液体澄清，表明供试品无菌。

【检验结果的解释】

标本中少量的细菌因生长繁殖增多，出现肉眼能看到的现象（浑浊、菌膜、白色颗粒等）；

【检验方法的局限性】

只能判断有无染菌，不能进行计数，不能进行计数；

【产品性能指标】

1. pH：7.1士0.2；

2. 氧化能力：接种时氧化层不应超过培养基深度的1/5 ；

3. 灵敏度：加小于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌后培养基应生长良好。

4. 稳定性：在2~25℃避光条件下储存至有效期的产品的pH、灵敏度等性能应符合要求。

【注意事项】

1. 使用前检查培养液内若有染菌（有混浊、白色颗粒等）或漏液现象，请勿使用；

2. 作厌氧菌培养时若氧化层（颜色为红色或粉红色）超过培养基的1/3，须水浴加热煮沸，从沸腾时开始计时，加热5~15 min（时间长短视氧化层的深度），至氧化层消失（不超过20min），取出静止冷却，只限加热一次，以防改变培养基成分；

3. 请在洁净的环境下操作，避免杂菌干扰；

4. 弃物处理：使用后应高压灭菌后方可按一般垃圾处理，也可按专业技术人员指示方法处理。