光度计

光度计介绍

光度计通常是指分光光度计，也被称为光谱仪（spectrometer)，它是一种将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。该测试范围通常为可见光区（380-780纳米）和200-380纳米的紫外光区。由于各种光源具有自己独特的发光特性，所以可以选用各种发光材料来做测量光源。钨灯的发光光谱：由钨灯光源发出的380~780 nm的光谱光，经过三棱镜的折射，可以得到红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫的连续色谱；该色谱可作为可见光分光光度计的光源。

在现代分子生物学实验中，光度计是一种常用的仪器。该装置主要包括：光源，单色器，样品室，检测器，信号处理装置，以及显示和储存系统。它的主要原理是，利用一个能够产生多个波长的光源，利用系列分光设备，从而产生特定波长的光源。当光线穿过测试的样品后，一部分光线被吸收，并对样品的吸光值进行计算，然后将其转换成样品的浓度，样品的吸光值与样品的浓度成正比。与此同时，光度计如今已经成为一种常见的、精密的仪表，它在进行工作的时候，因为工作环境、操作方式等各种因素，它的技术状态不可避免地会出现一些改变，这就会对设备的性能产生一定的影响，甚至会导致设备的故障和事故。所以，作为一名分析员，应熟悉该光度计的工作原理，掌握其用法，并能及时发现并消除潜在的危险，对出现的问题，应立即进行修复，以确保该光度计的安全，一般有以下几个问题：①当检测波长较大时，应等待一段时间，待灯管达到热平衡后，再将“0”、“100%”两个数值调准。之后，就可以重新衡量了。②指针型仪表在没有供电的情况下，其指针应在0的标尺上。如果不是这样，则需要进行机械的零点调整。③用完药瓶后，应及时用蒸馏水清洗，并用柔软的纱布擦拭，避免药瓶表面光泽受损，从而影响药瓶的透明度。④不能随意移动电灯和后视镜，否则会影响照明效果。⑤1900型等分光光度计，因为其光电接收装置是光电倍增管，所以其自身的特性是放大倍数大，所以只能用来检测微弱的光电信号，不能用来检测强光。不然，极易出现信号漂移，降低了检测的灵敏度。由于它的这些特性，在维护和使用这类仪器的时候，要特别小心，不要让它长期曝晒在光线下，所以在进行预热的时候，要把比色皿的盖子打开，或者使用遮光条，以免由于长期的曝晒而造成它的性能变化，从而造成工作不稳定。⑥当放大器感度达到变速时，应再次调零。⑦量器与量器的配伍问题。试管一定要与之匹配，不然会影响检测结果的准确性。在每一次试验之前，都要做一次对比。具体做法是：将相同的液体分别注入两个被测试的玻璃杯中，将该装置放置在一定波长的地方，用石英试管；220纳米，700纳米，玻璃瓶：700纳米，将蒸馏水装在700纳米的地方，将其中一个池子的透过率调整到100%，再分别测定其它池子中的透过率，并将两个池子中透过率的差异和光线的流向进行比较，如果透过率差异在±0.5%以内，那么就可以配合使用，如果超过这个范围，就要考虑到它对试验的影响。

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光度计图片

光度计注意事项

仪器存放于干燥之室，并置于稳固而平滑之台面上，室内光线不能过强。在炎热的天气里，千万不要使用风扇，因为这样会使灯泡的灯丝发光不稳。用户在使用此装置之前，必须先熟悉此装置的构造与工作原理，并熟悉各操作按钮的作用。在没有通电前，应先检查仪表的安全性能，供电可靠，各调整旋钮的起动位置正确，再通电。同时，在没有通电的时候，电表的指针一定要在“0”的直线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。

光度计使用方法

1、接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，进行10分钟的预热。

2、把灵敏度开关调整到“1”（如果零位调整装置无法调整到“0”，则应选择更高级别的感光开关）。

3、将波长选择按钮旋转到所需要的波长上。

4、在比色杯中加入3/4的空白溶液和检测溶液，用擦镜纸擦拭干净外壁，然后置入试样室，将空白试管对准光路。

5、调整黑盒盖子打开时的零点调整器，使得读取盘指针在 t=0的地方。

6、合上暗盒盖子，调整“100”调整装置，将空白试管 t=100，待指针趋于平稳后，将试管中各试管的光密度值依次读取，并作好记号。

7、比色结束后，关闭电源，将试管移出，清洗干净，试管间用柔软的抹布或纸巾擦拭干净。

光度计特点

采用特殊的双光路和双光束结构，具有较高的设备分辨力和较低的杂散光，提高了设备的稳定性和可靠性，提高了分析的准确性；而特殊的长光程光路的设计，使得本装置具有较高的解析度，特别适用于微型试验，使得试验结果可以被完全利用，使用者可以更方便、快速地进行修改；并使用了320×240比特的点阵高亮度6英寸 LCD，使其显示的内容更清楚、更全面；采用悬浮式光学系统，整体光路由16毫米厚度的不会发生变形的铝合金底座支撑，不会受到地面的形变或外部的振动的干扰，因此，极大地增强了设备的稳定性与可靠性；采用同轴式结构，具有高精度和良好的可重复性；采用 ARM技术，可实现0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、4.5等六个频段的频段自动切换，以适应不同使用者的需要；24位的高速度，高精度的 A/D变换，使测量更精确，更快速的响应速度；本机的主要部件均为进口的结构，降低了设备的杂散，提高了设备的稳定性和可靠性。

光度计作用

用于测量物质分子对不同波长（或特定律长）光的吸收强度，例如核酸的定量、蛋白质的直接定量（UV法）、比色法蛋白质定量、细菌细胞密度（OD 600）等等都是光度计最直接的运用。