乳腺癌组织胸苷磷酸化酶的表达

          【摘要】 目的探讨人乳腺癌组织胸苷磷酸化酶(TP)的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组化S-P法 检测乳腺癌组织54例和正常乳腺组织20例中TP的表达。结果TP蛋白在乳腺癌组织中阳性表达率为77.8%．显著高于正常乳腺组织的40.0% (P<o.os)。不同组织学分级的TP蛋白表达率差异有统计学意义，TP蛋白高表达率与乳腺癌组织学分级有关(P<o-01)。结论TP蛋白在乳腺癌组织中表达增强，其表达与乳腺癌的组织学分级有关，其高表达提示预后不良。 
          【关键词】 乳腺癌；胸苷磷酸化酶胸苷磷酸化酶( thymidine phosphorylase，rIP)即血小板源 性内皮细胞生长因子，广泛存在于原核生物及真核生物细胞中，是近年来发现的5-氟尿嘧啶(5-Fu)代谢途径中的关键酶，台皂催化5-Fu前体药在瘤内激活[IJ.该酶同时又具有促进 内皮细胞迁徙以及抗细胞凋亡的作用，从而在促进血管生成中发挥重要作用[2]。它与肿瘤的血管生成、浸润和转移，化疗效果及进展预后均有密切联系[3]。本斫究作者检测了TP在人乳 腺癌中的表达，并探讨TP在乳腺癌中的表达及其与临床病理 特征之间的关系，为临床治疗提供理论依据。 
          1资料与方法 
          1.1研究对象河源市人民医院2006年1月到2011年1月手术切除的54例乳腺癌和20例正常乳腺组织标本，年龄26 -73岁，平均(46.7±8.6)岁。所有标本均由两位以上职称病理医师诊断并再次确认，所有患者术前均未进行放疗和化 疗。运用免疫组化法检测54例乳腺癌标本及20例正常对照标本中TP蛋白的表达水平。 
          1.2 TP蛋白表达的检测所有组织标本在采集送检后先用10%福尔马林液固定、石蜡包埋、SpL厚连续切片，再采用S-P法 按照S-P试剂盒操作说明书进行免疫组化染色。S-P试剂盒购自福建迈新生物公司。 
          1.3结果判读将定位于肿瘤细胞胞浆、染成棕黄色的标本判读为TP表达阳性，根据每张切片的阳性细胞率、阳性细胞着色强度分别进行计分，阳性切片标本为细胞胞浆内染色呈棕黄色者，阴性切片标本的胞浆内为未见棕黄色颗粒者，阳性程度 根据不同积分值进行判读，0分为阴性、1分为弱阳性、2分为阳性、3分为强阳性，细胞核也被着色时可判读为’rP蛋白强阳性表达。阳性细胞率以计数每5个高倍铙视野所有细胞为准，显微镜高倍视野下平均每个视野内阳性细胞所占比例≤5%为0分．6% - 300-/0为1分，31% - 70%为2分，超过71%则为3分。按照两项之和处于1-3分间为低表达rIP蛋白，处于4-6分间为高表达rIP蛋白。 
          1.4统计学处理采用SPSS 13.0软件进行统计学分析，采用x=检验及Fisher's精确概率检验，P<0.05为差异有统计学意义：
          2结果
          2.1乳腺癌和正常乳腺组织中TP蛋白表达情况1P蛋白在乳腺癌组织中高表达，在坏死的肿瘤组织中则不表达。1P蛋白在 乳腺癌组织中的阳性表达率显著高于正常乳瞻组织，差异有统 计学意义(P<0.05)，见表l。 2.2 TP蛋白表达与临床病理特征之间的关系乳腺癌组织中TP蛋白的表达与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移无统计学关 联(P>0.05)，但不同组织学分级的TP蛋白表达率差异有统计学意义(_P<0.01)。见表2。 
         

          3讨论
          TP是由2条多肽链组成、参与核苷代谢的同源二聚体，TP能特异性地作用于胸苷并使其发生可逆性磷酸化反应，从而 调节体内胸苷的代谢水平。其主要作用表现在参与催化胸腺嘧啶脱氧核苷、脱氧尿嘧啶及其类似物的可逆性磷酸化，进而维持体内胸苷水平的稳定。TP还参与氟尿嘧啶类药物的代谢活化 并生成具有抗癌活性的产物。同时TP有较强的趋化内皮细胞、 促进血管生成的作用，有研究[-1显示，TP在多种肿瘤的血管 发生和浸润方面起着重要作用，如结肠癌、乳腺癌、胃癌、膀胱癌等。TP茌体内分布广泛，表达差异也较大。还有研究[5]显示，TP在许多实体瘤中的表达高于相应起源的正常组织，如 胃、结肠、膀胱、宫颈、卵巢、肾脏等。研究[s]表明，间质 含量的不同也会影响TP水平，肿瘤组织中TP高表达与肿瘤的 巨噬细胞、淋巴细胞等间质含量不同有关。 本研究发现，乳腺癌组织的TP含量升高明显，显著高于 正常乳腺组织，这与Ruckhaberle等[，1的研究一致，提示TP蛋白在乳腺癌组织与正常组织中的表达差异可进一步提示肿瘤 是否发生转移；根据Ruckhaberle等[7]以及Wang等[s3学者 的研究结果，提示TP的高表达与肿瘤的不良预后有显著关系，而本研究结果也与报道相符。同时研究结果也显示乳腺癌组织 中TP蛋白的表达率在不同的组织学分级中有统计学差异，而 与年龄、肿瘤大小、淋巴结转移无关，这进一步提示TP在乳腺癌的进展中起重要作用，TP高表达可提示乳腺癌的不良预 后。TP表达与乳腺癌分化程度有密切关系，这可能与TP本身在细胞DNA代谢中的作用、与5-FU的关系及TP在促进乳腺 癌血管生成中所起的作用进而影响乳腺癌的进展过程，而国外 一些研究资料[91提示乳腺癌肿瘤细胞通过某些机制导致TP高表达，丽且由于TP在乳腺癌血管生成中的重要作用，对癌细胞的生物学特性产生影响，增强了其恶性行为，这些也进一步证实了TP在促进乳腺癌血管生成中具有重要作用。目前多数学者叫认为TP可以作为恶性肿瘤的预后因子，其高表达 提示不良的预后，抑制TP的表达能抑制肿瘤的血管形成，阻 断乳腺癌的发生发展，为抗血管生成治疗提供帮助。 随着分子生物学和免疫病理学技术的不断发展，TP与肿瘤 血管生成的生物治疗技术将得到更加广泛和深入的研究[11]， 对TP的深入研究将会为肿瘤的治疗提供更多有效的途径。 
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          （责任编辑：钟婷婷）