抗链球菌溶血素O在Cobas c501生化分析仪上的比对试验

【摘要】 目的: 对“抗链球菌溶血素O诊断试剂盒”在Cobas c501生化分析仪上进行体外诊断和分析。方法: 收集临床“风湿热”患者血标本135份, 用已具备中国注册证和临床常规使用的免疫比浊方法与罗氏诊断产品(上海)有限公司“抗链球菌溶血素O诊断试剂盒”作比对检测, 评价其试验结果。结果: 用参比试剂和考核试剂共检测各类标本135份, 参比试剂与考核试剂显著有关(r=0.966, y=1.204x-22.217, R2=0.9333)。结论: 抗链球菌溶血素O在Cobas c501生化分析仪上的应用与参比试剂间总体的符合情况良好。

【关键词】 抗链球菌溶血素O; 质控品; 生化分析

特异性抗体的免疫测定可为临床判断链球菌感染程度及病期提供有用信息。其中, 抗链球菌溶血素O抗体(ASO)浓度的测定在临床上应用的为广泛。“抗链球菌溶血素O诊断试剂盒”采用免疫比浊法原理[1, 2], 在在Cobas c501生化分析仪上应用具有准确、 快速检测的临床意义。

　　1 材料和方法

　　1.1 标本收集 收集本院2009-03/2009-06门诊和住院“风湿热”患者送检的血液样本共135份(其中含溶血标本10份、 脂血标本10份、 RF(+)10份及黄疸标本5份)。

　　1.2 主要试剂 抗链球菌溶血素O诊断试剂盒(规格150Test和Test), 及相关试剂Precinorm Protein(批号18234301)、 Precipath Protein(批号18234401)及C.f.a.s.PAC(批号18210901)均购自德国罗氏诊断产品(上海)有限公司。对比试验产品的确立, 选择有国家食品药品监督管理局批准文号的“抗链球菌溶血素O诊断试剂盒”[注册证号: SFDA(I)20053402551]作为参比试剂, 与被考核试剂做对比试验。

　　1.3 方法

　　1.3.1 试剂对照试验 运用参比试剂和考核试剂在Cobas Integra 400 plus生化分析仪和Cobas c501生化分析仪上进行同步检测。精密度试验选取高、 低浓度样本分别检测10 次, 计算CV值。相关性分析以参比试剂为相对标准, 进行回归分析, 计算相关系数。

　　1.3.2 质量控制方法 按本实验室日常质控要求进行。在试验前做好Cobas c501和Cobas Integra 400 puls分析仪的日常维护保养, 确定定标曲线在有效期内, 定标结果良好。试验前用考核试剂和参比试剂分别检测质控品, 确保质控品的检测值位于靶值范围内。

　　2 结果

　　2.1 研究检测样本量 本次研究用参比试剂和被考核试剂同时检测ASO的各类样本共计135份, 其中异常值样本36份; 正常范围样本64份; 溶血样本10份; 脂血样本10份; 黄疸样本5样本; RF阳性样本10份。

　　2.2 精密度试验结果 试验开始前参比与考核试剂的定标、 机器运行状态良好, 质控结果良好(表1)。对被考核试剂进行精密度考核, 在实验中做了批内CV。批内CV(n=10), 结果见表2。表1 ASLO临床研究质控结果表2 考核试剂测量精密度

　2.3 对比检测结果 用参比试剂和被考核同时检测的样本共计135份, 对135份对比检测结果进行了相关分析, 相关统计学分析显示r=0.966, y=1.204x-20.17, R2=0.9333, 见图1。

　　图1 ASO对比检测相关分析

　　3 讨论

　　A群链球菌可导致各种感染[3], 这些感染可导致心脏与肾脏损害。通过早期诊断、 有效治疗, 与对患者的监测, 可降低这些风险。本研究的精密度试验的部分, 被考核试剂“抗链球菌溶血素O诊断试剂盒”不同浓度多次测量变异系数<5%, 质控值位于靶值范围, 提示该试剂盒性能可靠、 方法稳定。我们以已有中国注册证的“抗链球菌溶血素O诊断试剂盒”作为参考体, 对比检测和验证被考核试剂临床应用的可行性及检测结果的可靠性。共检测样本135例, 对比分析结果表明, 参比试剂与考核试剂的相关系数达到0.966, 线形回归方程: y=1.204x-22.217, 回归系数R2=0.9333。被考核试剂的检测结果与参比试剂相关性较好, 二者总体符合情况良好。此次临床研究的标本包含常见临床样本和潜在干扰样本等类型, 与参比试剂的对比检测研究表明, 被考核试剂检测具备临床可行性, 检测结果可靠。方法学比对实验是实验在引用一个新的试剂盒时必须要做的非常重要的实验之一, 目的是获得新方法引入后的系统误差估计或偏倚, 即正确度的评估。本实验通过改善校准手段, 参比试剂与考核试剂的比例误差符合要求。

【参考文献】
　[1] Thomas L. Bakterielle Infektionen. In: Thomas L, ed. Labor und Diagnose[M]. 4th ed. Marburg: Die Medizinische Verlagsgesellschaft, 1992: 1492-1530.

　　[2] Otsuji S, Kamada T, Matsuura T, et al. A rapid turbidimetric immunoassay for serum antistreptolysinO[J]. J Clin Lab Anal, 1990, 4: 241-245.

　　[3] Curtis GDW, Kraak WAG, Mitchell RG. Comparison of latex and haemolysin tests for determinatio of antistreptolysin O(ASO) antibodies[J]. J Clin Pathol, 1988, 41: 1331-1333.