罕见病患者的希望，新技术带来RNA疗法，提前预测对哪些患者更有效

患有罕见遗传疾病的人，实际上是很常见的。每十个人中就有一个人患有罕见遗传病，这意味着全世界有数亿人患有罕见病。之所以被称为罕见病，是因为这些疾病类型超过7000种，导致每种疾病的患病人数相对罕见，这些患者只有约5%得到了治疗。 基因组学的发展使人类得知遗传疾病的本质——源于基因本身的突变。如果能修正这些基因突变，使其恢复正确形式，就可以从根本上治人类遗传病。剪接转换反义寡核苷酸（Splice-switching ASO）可用于治疗遗传疾病，但一种遗传病往往有多种突变形式，ASO只能针对其中一部分，如何系统地甄别这些个体仍然是一个挑战。 

研究开发了一种预测分类法来评估每个患者对剪接转换ASO的适应性，并表明15%的毛细血管扩张性共济失调综合征（A-T）患者可通过个性化ASO治疗干预得到恢复。这些研究结果为前瞻性识别可能受益于涉及ASO的治疗方法的遗传性疾病个体提供了一个框架。 此外，研究团队还开发了一款ASO疗法，用于治疗一名出生后不久被诊断出患有毛细血管扩张性共济失调综合征（A-T）的小女孩，该疗法显示出良好的耐受性，患者在治疗后三年内没有严重不良事件。

据估计，全球范围内大约有十分之一的人患有一种罕见疾病，其中有相当比例具有已知或假定的遗传病因，但只有大约5%的人得到有效治疗。这些疾病的罕见性常常使得开发基于传统模式的治疗方法在经济上不可行。 之前的研究表明，在某些情况下，剪接转换ASO可以恢复功能蛋白水平，并能安全、及时地给药。这种治疗为罕见遗传病提供了一个治疗机会。然而，如何识别适合这种治疗的基因变异个体仍然是一个挑战。 

在这项新研究中，研究团队提出了一个框架，使用毛细血管扩张性共济失调综合征（A-T）作为研究模型，以系统性发现和开发罕见疾病患者的ASO疗法。 A-T以进行性小脑病变、免疫缺陷和癌症易发为特征，是一种罕见的常染色体隐性遗传病，其全球患病率为4万-10万分之一。从遗传学的角度来看，A-T由ATM双等位基因功能丧失引起，ATM是一种参与细胞对DNA双链断裂反应的基因。

ATM疾病候选变异

在“经典”A-T患者（典型和普遍的临床表现）中，患者平均预期寿命为25岁，常见的早死原因是由于肺部疾病或癌症。在许多国家，A-T是常见的遗传性儿童进行性共济失调的形式，但缺乏有效的治疗方法，特别是对于严重影响生活质量的神经系统表现。 ATM基因的编码序列大小为9.2kb，这远超基因治疗递送载体的装载极限，目前可用的体内基因治疗递送载体AAV载体的转载容量为4.7kb。此外，ATM基因所编码的蛋白是一种细胞内激酶，这使得酶替代方法变得困难。相比之下，剪接转换ASO治疗是一个十分有吸引力的治疗选择，因为它可以通过鞘内注射很容易地分布到小脑。

可接受ASO治疗的遗传变异的筛选方法 

全球A-T家庭数据平台是一个由家庭倡导者领导的国际倡议，主要由A-T儿童项目（ATCP）资助，这是一个由A-T患者倡导的基金会。ATCP已经系统地收集了那些已被临床或基因诊断为A-T的个体的临床信息和基因组DNA（gDNA）。得益于此，研究团队对235个A-T个体（来自209个家庭）进行了全基因组测序（WGS）分析，得到了一个有关A-T的WGS数据集，并由此开发了一种预测分类法来评估每个患者对ASO干预的适应性。

ASO适应性验证 

预测结果表明，分别有9%和6%的A-T个体具有“可能”（probably）或“很可能”（possibly）可接受ASO剪接调节的遗传变异，大多数易接受的变异都位于外显子靶向测序无法获得的深层内含子区域。 更重要的是，研究团队成功依靠ASO干预治疗挽救了两种复发变异体患者成纤维细胞中的错误剪接和ATM细胞信号。此外，在一项试点临床研究中，其中一种ASO用于治疗一名出生后不久被诊断为A-T的小女孩，并显示出良好的耐受性，三年内没有严重的不良事件。

ASO的设计与筛选 

研究团队还注意到，在235名A-T患者的队列中，有35名患者具有ASO易治疗变异。进一步研究显示，只需要用5种ASO就可以治疗其中约70%的个体，而治疗所有35名患者需要15种不同的ASO药物。 这表明在传统的“一次一药”模型下开发个性化剪接转换ASO治疗的机遇和挑战。这些机遇和挑战将适用于其他特定变异的治疗策略（例如CRISPR基因编辑疗法），强调了对创新的、基于平台的科学和监管方法来释放其潜力的必要性。 

总而言之，这项发表于 Nature 的研究为个性化基因治疗如何工作提供了一个框架：利用基因组测序和分析来有效地识别可能适合剪接转换ASO干预的变异，及时设计、测试和部署合适的ASO。如果成功，这些方法将鼓励人们重新评估哪些基因是“可被纠正的”，由此开辟“基因治疗”的新时代！