创新性解析内皮细胞间质化新分子机制

缺血性疾病包括缺血性心脏病、缺血性脑疾病和外周动脉疾病（如：心肌梗死、动脉粥样硬化等），在现今仍具有较高的发病率和死亡率，对人类健康和社会经济发展构成重大危害。目前开展的许多临床试验表明促血管新生策略在缺血性疾病尤其是在缺血性心脏病的治疗亟待新的突破。2月22日，心脏病全国重点实验室、复旦大学附属中山医院葛均波、李华团队就血管内皮细胞间质转分化新机制的研究成果以长文Article形式在The Innovation期刊上正式上线发表（IF=32.1）为缺血性疾病的治疗改善提供了全新的思路。

团队发现转录因子GTF2H4能够促进内皮细胞在缺氧微环境中发生部分内皮间质化，改善缺血后微循环灌注，并详尽阐明了其潜在的分子机制。该研究揭示了部分内皮间质化在缺血性疾病血管新生中的关键作用，并首在体内外阐明转录因子GTF2H4能够通过NCOA3/NF-κb/Snail通路促进缺血缺氧诱导的部分内皮间质化，改善缺血后血运重建和组织修复。研究数据提示GTF2H4可能在缺血性疾病的靶向干预治疗中具有一定医学转化意义。

缺血缺氧环境诱导内皮细胞发生部分内皮间质化（EndMT）

葛均波、李华团队研究发现：在体实验中，小鼠心肌梗死后梗死边缘区内皮细胞逐渐获得α-SMA间充质标记物；体外实验中，微血管内皮细胞经缺氧处理后也获得α-SMA、Fibronectin等间充质标记物，并伴随有CD31和VE-Cadherin内皮标记物的部分丢失，内皮细胞的成管功能仍得以完全保留，提示缺血缺氧诱导内皮细胞发生部分EndMT。

GTF2H4缓解缺氧诱导的微血管内皮细胞损伤，并促进缺氧诱导的部分EndMT

研究团队发现转录因子GTF2H4对缺氧信号响应，随后确证了时序性缺氧与内皮细胞中GTF2H4表达水平的关联，并通过基因编辑技术证实GTF2H4能够缓解缺氧诱导的微血管内皮细胞损伤，并正向调控缺氧诱导的部分EndMT。

GTF2H4通过自噬介导的降解路径调控ERCC3，二者协同调控部分EndMT

研究团队开展4D-Label-Free蛋白质组学技术筛选得到了GTF2H4的靶分子ERCC3，进而，研究团队进行分子生物学实验验证了GTF2H4与ERCC3二者之间的互作关系，并得出GTF2H4通过自噬介导的降解路径调控ERCC3。

GTF2H4通过NCOA3 S1330位点的磷酸化调控NF-κB激活的部分EndMT

研究团队利用4D-Label-Free磷酸化蛋白质组学联合磷酸化蛋白质通路芯片开展高通量通路富集，并通过双荧光素酶、EMA等试验得出GTF2H4主要通过NF-κB/Snail这一信号通路调控部分EndMT。

深入研究中，针对NCOA3的1330位点进行点突变设计，构建磷酸化失活突变体S1330A和仿磷酸化突变体S1330E/D，得出GTF2H4能够促进NCOA3上1330位点的丝氨酸发生磷酸化，进而结合p65以激活NF-κB-Snail通路，发生部分EndMT。

动物在体研究中，实现小鼠下肢内皮细胞GTF2H4高表达或敲低后，再构建小鼠下肢缺血模型并动态监测其下肢血流及恢复情况，发现GTF2H4能够改善下肢缺血后血运重建，伴随部分EndMT发生。