糖尿病视网膜病变患者外周血内皮祖细胞数量的变化分析

         糖尿病(DM)是临床上常见的一组以高血糖为特征的代谢性疾病，近年来随着人们生活质量的提高，糖尿病的发病率呈明显上升趋势。有临床资料显示，血管内皮功能损伤是糖尿病患者的病理生理基础，而内皮祖细胞(EPCs)是血管内皮细胞的前细胞体[1]。笔者意在研究糖尿病视网膜病变(DR)患者外周血EPCs数量的变化情况，以为糖尿病并发症患者的治疗提供依据。

         1 资料与方法

         1.1 一般资料：选择我院2011年1月～2014年1月收治的糖尿病视网膜病变(DR)患者14例(DR组)，单纯糖尿病(DM)患者16例(DM组)，以及无糖尿病的老年性白内障患者15 例(对照组)。其中DR组男9例，女5例;年龄49～72岁，平均63.4岁;糖尿病病程平均12.3年。DR诊断标准符合国际眼科会议提出的相关诊断标准[2]。DM组男10例，女6例;年龄 43～79岁，平均60.2岁;糖尿病病程5.3年。且诊断符合中华糖尿病学会(CDS)标准(2010年版)的相关诊断标准[3]。对照组男10例，女5例，年龄50～78岁，平均64.8岁。排除冠心病、糖尿病肾病以及肿瘤等可能影响EPCs数量的全身性疾病。三组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

         1.2 方法：所有研究对象均于晨起空腹抽取静脉血10 ml，对糖化血红蛋白(HbAl c ) 、血红蛋白(Hb ) 以及白蛋白(ALB) 进行测定， 另取5 ml 离心分离血清待检， 培养1 0 d 后， 采用美国BD公司的流式细胞仪对EPCs 进行提取、标记及流式细胞计数，样品按需标记FITC-CD34、PECD133，数据由设门法分析，CD34、CD133双阳性的细胞为 EPCs。

         1.3 统计学方法：使用SPSS 16.0对各项资料进行统计、分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

         2 结果
 

         根据流式细胞仪检测结果显示，DR组、DM组和对照组 EPCs细胞数量分别为(48±11)个、(34±10)个、(90±24)个，三组两两比较差异有统计学意义(P<0.05)，详见表1。且经相关性分析发现，DR组患者中的EPCs的细胞量与HbAlc (γ=0.170)、Hb(γ=0.261)和ALB(γ=0.187)等水平均无相关性。详见表1。

         3 讨论
 

         EPCs是一群具有游走特性，能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞，且缺乏成熟内皮细胞的特征性表型，不能形成管腔样结构，但是临床研究证实，EPCs可产于血管内膜损伤后的内皮修复，并可分泌生长因子激活血管疾病的成熟内皮细胞，在正常情况下，EPCs主要定居于骨髓，外周血中的数量极少，但是在某些病理条件下，EPCs可从骨髓动员至外周血，近年来的研究发现，血管内皮功能异常是糖尿病早期病理改变。
        

         在本组的资料中，对DR患者、单纯糖尿病患者以及单纯老年性白内障患者的EPCs进行测定，结果显示，DR组和糖尿病组 EPCs数量明显少于单纯老年性白内障患者(P<0.05)，这一结果与毛春洁等研究结果一致[1]。作者根据临床资料和经验分析，认为EPCs数量减少的原因包括：①糖尿病患者的高糖环境可抑制骨髓产生EPCs。②糖尿病患者长期处于高血糖状态会增加氧化应激，这一反应会直接影响EPCs的生存时间，且会诱导其死亡。③糖尿病患者常伴有高血脂、动脉硬化等，可通过减少粒细胞集落刺激因子对EPCs的动员作用，进而减少循环EPCs的数量。有动物研究实验证实，糖尿病病程越长，视网膜病变越严重，EPCs数量越多，同时从本组资料结果中也可看出，DR组 EPCs数量大于单纯DM组(P<0.05)，这主要是由于在视网膜病变的过程中，产生的粒细胞集落刺激因子以及成纤维细胞生长因子、表皮生长因子等多种细胞因子可促使许多EPCs从骨髓中迁移，并定植与视网膜缺血部位，导致病理性新生血管的生成[4]。并且由此我们推断，在糖尿病视网膜病变患者不同的发病时期其作用机制可能不同，随着视网膜病变的不断延长，高血糖对视网膜毛细血管周细胞及内皮细胞的代谢使得血管通透性增加，同时促进了EPCs的迁移、增生和分化，使得外周血EPCs的数量增加。在本组的资料中，未发现DR患者中的EPCs的细胞量与 HbAlc、Hb和ALB等水平相关，这一结果与国外一些报道不一致，笔者认为这可能与本组样本量较少有关，因此对于EPCs的细胞量与HbAlc、Hb和ALB水平是否相关，还需进一步加大样本研究。综上所述，在糖尿病患者并发视网膜病变前，其EPCs数量明显减少，而随着疾病的进展，特别是糖尿病患者并发DR等并发症后，EPCs数量会逐渐增加，因此外周血EPCs水平可在一定程度上反应DR疾病的发生、发展情况，并可作为在一定程度上作为监测DR进展的一个重要指标。

         4 参考文献

         [1] 毛春洁,张 惟,陈 松,等.糖尿病视网膜病变患者外周血内皮祖细胞数量及功能的变化[J].中华眼底病杂志,2012,28(3):224.
 

         [2] 刘华伟,王丽莉,刘庆君,等.2型糖尿病患者外周血内皮祖细胞数量变化及机制探讨[J].天津医科大学学报,2013,19(4): 323.
 

         [3] 谢安明,王雅君,崔丽琚.血管内皮祖细胞与VEGF对增生性糖尿病视网膜病变新生血管形成的影响[J].西安交通大学学报,2013,34(2):233.
 

         [4] 贾爱华,王 荣,刘新艳.尿微量白蛋白与糖尿病视网膜病变相关性分析[J].吉林医学,2013,34(4):652.
 

         [收稿日期：2014-05-13 编校：苏建东]