确认羊膜间充质干细胞的抗炎细胞疗法对杜氏肌肉萎缩症的有效性

DMD是一种严重的遗传性疾病，在肌肉疾病中发病频率高（约3500分之1的男孩），由于抗肌萎缩蛋白完全缺失，伴有慢性炎症的进行性肌肉功能障碍，导致呼吸衰竭和心肌病。一方面，通过基因治疗等以恢复抗肌萎缩蛋白为目的的根本治疗被认为是有希望的，另一方面，骨骼肌组织的慢性炎症被认为是促进功能障碍的主要原因。类固醇的对症疗法，从效果的个人差异和长期服用引起的副作用的观点来看，希望开发出针对慢性炎症的新的治疗方法。

羊膜间充质干细胞（AMSCs）与骨髓等相比，含有组织的细胞数非常多，因此从同一批羊膜间充质干细胞中提取扩大培养非常容易。另外，由于来源于幼幼组织，细胞增殖功能旺盛，在继承培养中染色体结构的稳定性也很高，这一点作为优点被指出。由于AMSCs具有与骨髓MSCs类似的免疫控制作用，而骨髓MSCs已经作为移植抗宿主病的细胞制剂上市，因此该研究小组将重点放在了DMD骨骼肌中AMSCs的炎症控制作用上。

用模型老鼠确认hAMSCs的炎症控制和之后的肌纤维坏死的抑制效果

首先，研究表明，与外周血单核细胞（PBMC）共同培养的人源AMSCs（hAMSCs）通过前列腺素E2（PGE2）的产生，促进抗炎性M2巨噬细胞（MΦ）的活性。将hAMSCs和DMD模型mdx小鼠来源骨骼肌细胞共同培养，迄今为止骨髓MSCs的M2MΦhAMSCs诱导了与在活化过程中已知表达增加的细胞生成素·趋化因子相同的分泌因子。在hAMSCs中，在DMD环境下，也以与骨髓MSCs同样的机制进行M2MΦ的活性化的可能性。

因此，对年幼期mdx小鼠进行尾静脉注射hAMSCs（每周1次，4次），验证了hAMSCs在炎症控制和运动功能方面的治疗效果。hAMSCs注射小鼠的胫骨前肌病理图像显示，与未治疗小鼠相比，细胞浸润区域有限，肌肉纤维间间隙较窄，表现出轻症倾向。另外，在未治疗的小鼠中发现的大范围的MΦ（F4/80）且CD206在治疗小鼠中未观察到阴性浸润，多数为M2MΦ（CD206阳性）。此外，治疗小鼠在炎症导致肌肉纤维坏死后，再生的中心核纤维比例减少，hAMSCs对炎症控制和后续肌肉纤维坏死的抑制效果明显。

确认治疗小鼠的长期运动功能维持效果，跑步耐力改善

此时，治疗小鼠的横膈膜上出现白细胞介素（IL）-1受体拮抗剂（IL- 1ra），胫骨前肌上出现TIMP-1（Tissue inhibitor of me[x]talloproteinase-1）的表达增加，相反白细胞介素（IL）-6的值减少，表明治疗小鼠骨骼肌的炎症控制和组织修复引起了微环境的变化。接受治疗的小鼠在使用hAMSCs 4周后~ 40周以上仍能保持握力，显示出长期运动功能的维持效果。

接着，通过测量车轮旋转次数的自发运动量，治疗小鼠的行走速度与未治疗小鼠相同，但每天的行走距离和夜间活动量都有所增加。与未接受治疗的小鼠相比，接受治疗的小鼠每分钟的持续跑动距离更长，这表明小鼠的跑动持久力明显改善。

利用hAMSCs，期待开发延迟DMD病情进展的新型细胞治疗

此次研究小组在推进利用MSCs的炎症控制作用的细胞移植基础研究的过程中，证明了使用hAMSCs的DMD小鼠的病理缓解、炎症平息、运动功能的治疗效果。

研究小组表示，通过活用hAMSCs，有望开发出延迟DMD病情进展的新细胞治疗法。