甲状腺乳头状癌组织中VEGF-C及VEGFR3的表达及意义

作者：高恒宇 马文平 王建堃 张雅芳

作者单位：哈尔滨医科大学解剖教研室

【摘要】  　　目的 观察VEGF-C和VEGFR3在甲状腺乳头状癌组织中的表达，研究二者表达的相关性，探讨甲状腺乳头状癌细胞淋巴管转移机理。方法 用免疫组化方法检测VEGF-C和VEGFR3在人甲状腺乳头状癌、甲状腺腺瘤中的表达情况，并进行比较和分析。结果 在甲状腺乳头状癌、甲状腺腺瘤组织中均见到VEGF-C和VEGFR3阳性表达，但在甲状腺乳头状癌组织VEGF-C和VEGFR3的表达率和表达强度均高于甲状腺腺瘤，且VEGF-C和VEGFR3在甲状腺乳头状癌中的表达呈正相关。结论 VEGF-C和VEGFR3在甲状腺乳头状癌细胞中高表达，并且可能与此肿瘤的淋巴管转移相关。

【关键词】  甲状腺乳头状癌 VEGF-C VEGFR3 免疫组化

　　The ex[x]pression of VEGF-C and VEGFR3 in Papillary Thyroid Carcinoma and its significance

　　GAO Heng-yu，et al.

　　(Department of Anatomy, Harbin Medical University, Harbin 150086 China)
   
　　【Abstract】  ob[x]jective  To observe the ex[x]pression of VEGF-C and VEGFR3 in Papillary Thyroid Carcinoma and lymphoducts of Papillary Thyroid Carcinoma and to study its correlation,in order to elucidate the mechanism of lymphatic me[x]tastasis of cancer cell.   Methods  To examine the ex[x]pression of VEGF-C and VEGFR3 in Papillary Thyroid Carcinoma and Thyroid adenimas by immunohistochemical staining, and for comparison and analysis. Results  Both VEGF-C and VEGFR3 expressed in Papillary Thyroid Carcinoma and Thyroid adenimas.The rate and intension of VEGF-C and VEGFR3 proteins ex[x]pression were higher in Papillary Thyroid Carcinoma than in Thyroid adenimas,and the ex[x]pression of VEGF-C and VEGFR3 in Papillary Thyroid Carcinoma expressed positive correlation. Conclusions  The VEGFR3 and VEGF-C in cancer cells of papillary thyroid carcinoma have high intensive ex[x]pression and have positive correlations with the cancer me[x]tastasis.
   
　　【Key words】  Papillary thyroid carcinoma  VEGF-C  VEGFR3  Immunohistochemistry
   
　　甲状腺癌是常见的肿瘤之一,在全球范围内有很高的发病率和致死率。我国年发病率为0.5～40.0人/10万人，女性患者较多，对人类的健康危害很大。甲状腺乳头状癌的转移方式多为淋巴结转移，但是对于甲状腺乳头状癌的转移机制尚不十分清楚。本研究旨在通过观察VEGF-C和VEGFR3在甲状腺乳头状癌中的表达情况探讨甲状腺乳头状癌的转移机制，为甲状腺乳头状癌转移提供生物学依据，为甲状腺乳头状癌的临床诊断及判断预后提供参考。

　　1  材料与方法

　　1.1  实验材料  取24例病理活检证实为甲状腺乳头状癌癌组织，16例甲状腺腺瘤组织，由齐齐哈尔医学院附属医院和附属第二医院病理科提供。兔抗人VEGF-C 多克隆抗体、兔抗人VEGFR3多克隆抗体、PV9000 两步法免疫组化试剂盒（均购自武汉博士德生物工程有限公司）。

　　1.2  实验方法  将甲状腺乳头状癌标本和甲状腺腺瘤分别取材，经4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，石蜡切片机连续切片，片厚4μm,分别进行VEGF-C 和VEGFR3的两步法免疫组化染色，苏木素复染，光学显微镜观察，计算机统计分析。

　　2  结果

　　2.1  VEGF-C 及VEGFR3在甲状腺腺瘤组织及甲状腺乳头状癌中的表达情况

　　2.1.1  甲状腺腺瘤组织中VEGF-C及VEGFR3的表达  在甲状腺腺瘤组织中，VEGF-C 在3例样本中呈阳性表达，表达于甲状腺腺细胞胞浆，阳性率为18.8%（3/16），淋巴管无表达(图1见封四)。VEGFR3 在甲状腺腺瘤细胞未见阳性表达，在甲状腺腺细胞间可见在血管内皮细胞上呈弱阳性表达，阳性率为25%（4/16）(图2见封四)。

　　2.1.2  甲状腺乳头状癌中VEGF-C 及VEGFR3的表达  在甲状腺乳头状癌组织中，VEGF-C 在甲状腺乳头状癌癌细胞胞浆中表达（图3见封四），分布均匀，阳性率为83.3%（20/24）；VEGFR3 主要在甲状腺乳头状癌细胞间的血管内皮细胞上表达，可见血管壁上呈棕黄色颗粒的阳性表达(图4见封四)，阳性率为91.7%（22/24）。两者进行相关分析，r=0.5618，P<0.01,呈正相关。
 
　　2.2  VEGF-C 及VEGFR3 表达情况的的比较,详细结果见表1。

　　表1  甲状腺腺瘤与甲状腺乳头状癌VEGF-C和VEGFR3表达的比较（略）

　　注：其中1与2、3与4比较，P<0.05，有显著差异。
 
　　3  讨论

　　3.1  VEGF-C（血管内皮生长因子相关蛋白）是一种特异性使淋巴管增生的细胞因子，又名淋巴管生成因子。它是VEGF家族的成员之一，其与相应的受体VEGFR3结合，可导致淋巴管内皮细胞增殖，诱导淋巴管的增生，从而促进肿瘤的淋巴结转移。因此，它的高表达被认为与肿瘤细胞的区域淋巴结转移密切相关。
   
　　目前研究发现，VEGF-C在许多恶性肿瘤中高表达，与肿瘤的浸润、转移、复发密切相关，如胃癌、肺癌、乳腺癌、大肠癌、前列腺癌等。Amioka等［1］曾经报道，VEGF-C在胃癌中表达阳性，而且其表达程度与淋巴结转移、淋巴管浸润及预后有关。李晓明等［2］研究78例非小细胞肺癌组织发现，VEGF-C在伴有淋巴结转移的肺癌组织中的表达显著高于无淋巴结转移组。Skobe等［3］在研究人乳腺癌细胞时发现，VEGF-C可诱导乳腺癌中淋巴管生成，并可促进乳腺癌的肿瘤细胞向区域淋巴结和肺进行转移扩散。Furudoi等［4］研究发现，在结肠癌中，VEGF-C表达阳性率很高，还与淋巴管生成和淋巴结转移密切相关。Tsurusaki等［5］发现，在前列腺癌中，淋巴结转移阳性组的VEGF-C表达水平明显高于淋巴结转移阴性组，并且VEGF-C表达阳性者淋巴管的数量明显增多。
   
　　本实验中，VEGF-C在甲状腺腺瘤中表达阳性率为18.8%，在甲状腺乳头状癌中表达阳性率为83.3%，二者比较P<0.05，有显著差异； VEGFR3在甲状腺腺瘤中的表达为25%、甲状腺乳头状癌中的表达为91.7%，二者比较P<0.05，有显著差异；且VEGF-C和VEGFR3在甲状腺乳头状癌中均为高表达，这意味着有大量淋巴管生成，这为癌细胞的淋巴转移提供了可能。

　　3.2  VEGF-C如果与受体VEGFR2结合则促进微血管生成，而如果与受体VEGFR3结合则促进淋巴管的生成，通过对比VEGF-C与VEGFR3在甲状腺乳头状癌中的表达情况，我们发现，VEGF-C与VEGFR3的表达呈正相关，说明了VEGF-C主要是与VEGFR3结合，从而促进了淋巴管的生成，使甲状腺乳头状癌的淋巴转移的机率增加，这与甲状腺乳头状癌在临床上易出现颈部淋巴结转移相符，临床可根据患者病变组织的VEGF-C及VEGFR3表达情况判断预后，具体方法和标准还需进一步探索。

【参考文献】
  　　［1］ Amiko T, Kitadai Y, Tanaka S, et al. Vascular endothelial growth factor C ex[x]pression predicts lymph node me[x]tastasis of human gastric carcinomas invading the submucosa［J］.Eur J Cancer,2002,38(10):1413-1419

　　［2］ 李晓明，杨军，黄国胜，等.非小细胞肺癌组织中VEGF-C表达与淋巴转移的关系［J］.中国肺癌杂志,2005,8(1):28-31

　　［3］ Skobe M,Hawighorst T,Jackson DG,et al. Induction of tumor lymphangioge:nesis by VEGF-C promotes breast cancer me[x]tastasis［J］.Nat Med,2001,7(2):192-198

　　［4］ Furudoi A,Tanaka S, Haruma K, et al. Clinical significance of vascular endothelial growth factor C ex[x]pression and angiogenesis at the deepest invasive site of advanced colorectal carcinoma［J］. Oncology, 2002,62(2):157-166

　　［5］ Tsurusaki T,Kanda S,Sakai H,et al.Vascular endothelial growth factor-C ex[x]pression in human prostaic carcinoma and its relationship to lymph node me[x]tastasis［J］.Br J Cancer,1999,80(12):309-313