不同金属烤瓷冠对龈沟液内肿瘤坏死因子-α水平的影响

　作者：卓锋,汲平　　作者单位：山东大学口腔医学院修复科，山东 济南 250012

　　【摘要】目的 通过对不同材料的烤瓷冠修复后龈沟液 (gingival crevicular fluid，GCF)内肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)水平的测定，探讨内冠材料对牙周的影响。方法 选择临床病例24例，采用镍铬合金烤瓷冠和金铂合金烤瓷冠修复，分别在修复前、修复后6个月进行临床检查和取GCF，进行GCF量和TNF-α水平的测定。结果 6个月时镍铬合金组与金铂合金组在指标上均有明显差异。结论 非贵金属对牙周组织有不利影响。
　　【关键词】 烤瓷熔附金属全冠;龈沟液;肿瘤坏死因子

　　Effect of different PFM materials on the level of TNF-α in gingival crevicular fluid

　　ZHUO Feng，JI Ping

　　(Dept. of Prosthodontics，School of Stomatology，Shandong University，Jinan 250012，China)

　　Abstract: ob[x]jective: To investigate the effect of different inner crown materials on periodontal tissue by means of measuring the level of TNF-α in gingival crevicular fluid(GCF) after PFM restoration. Methods: The anterior teeth of 24 patients selected by random were restored by Ni-Cr alloy PFM and Au-Pt alloy PFM.GCF was collected from labial and lingual of mesial site and distal site before the tooth preparation by filter paper.At the point of 6 month after cementation，GCF was collected at the same sites.The level of TNF-α was detected by enzyme-li[x]nked-immunoadsorbent assay(ELISA)method，and analyzed the variation between the pre-restoration and post-restoration.Results: Compared with pre-restoration，all indexes had significant difference between the Ni-Cr alloy group and the Au-Pt alloy group after 6 month. Conclusion: Non-noble me[x]tal has bad effect on the peirodontal tissue.

　　Key words:porcelain-fused-to-me[x]tal(PFM); gingival　crevicular　fluid(GCF); tumor necrosis factor(TNF)

　　烤瓷熔附金属冠(porcelain-fused-to-me[x]tal，PFM)桥修复体颜色逼真，美观、舒适，疗程短，效果好，为牙体、牙列缺损患者所欢迎。许多研究表明，烤瓷冠桥修复后会对牙周产生不同程度的影响，尤其是镍铬合金烤瓷冠修复后临床观察有龈缘黑线、红肿、出血，甚至溢脓、萎缩的情况，而金铂合金则少有此类情况，已引起修复医生的普遍关注。随着牙周病学的发展，近年来一些学者以龈沟液(gingival crevicular fluid，GCF)为研究对象，通过检测其生化成分水平的变化，发现一些物质成分有明显的质和量的改变，并与牙周组织的活动性明显相关，从而为研究修复后牙周状况提供了理论依据。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是一种来源广泛的炎性细胞因子，在诸如牙周炎等慢性炎症反应中扮演非常重要的角色，已有研究表明它可通过自分泌和 (或)旁分泌途径，作用于免疫细胞而导致组织破坏和骨吸收。但关于烤瓷修复后TNF-α水平的变化国内外少有报道。本研究通过监测不同金属基底烤瓷修复前后龈沟液中TNF-α水平的变化，探讨不同材料对龈沟液中TNF-α水平的影响，为临床合理选择烤瓷材料提供一些参考。
　　1 材料与方法
　　1.1 病例的选择

　　选取我院修复科欲行烤瓷修复的患者24例，其中男10例，女14例，平均35岁。烤瓷桥修复体只计基牙牙位数，桥体牙位不计在统计内。患者牙龈呈现浅红色正常色泽，无肿胀和充血症状，残根龈上>2 mm，X片示根周正常。牙列较完整，咬合关系基本正常。自实验开始起未服用过抗生素，妇女未妊娠。
　　1.2 方法

　　1.2.1 实验设计 根据内冠材料不同将其分为镍铬合金组、金铂合金组。其中每组各15例。修复前，所有受试牙进行临床指标检测，同时在龈沟内取样，烤瓷修复后6个月所有受试牙再次进行临床指标检测及在龈沟内取样，操作时先取样再进行临床检测。分别对修复前与修复后的各项指标进行组内纵向比较，修复后6个月各项指标2组之间横向比较。
　　1.2.2 修复体的制作要求 常规牙体制备，龈缘制备为直角肩台，宽度1 mm，位于龈沟内0.5 mm处;全冠制作时尽量恢复其正常的生理解剖外形，使牙冠轴面突度的增加不超过0.2 mm[1]。戴冠后要求修复体密合性在1～3级之内(参照Felton[2]的分级方法) 。
　　1.2.3 临床检查 以牙龈龈沟探诊深度(gingival crevice depth，GCD)为主要临床指标。用牙周探针沿着牙齿长轴在各个面探查，通常将牙的唇颊、舌侧分别在远中、中央和近中测量，每个牙记录6个位点的探诊深度，然后取其平均值。
　　1.2.4 GCF的采集、称重和分析 (1)GCF的采集和保存：将whatman 3MM型滤纸裁成2 mm×10 mm的滤纸条，高温高压消毒后每4根放入一个Ep管中，编号后用FAl004电子天平(上海天平仪器厂)称重备用。清洁并轻轻吹干患牙的取液区(唇、舌侧近、远中轴角处，4位点每牙)，将滤纸条沿牙面方向轻轻放入龈沟内至有轻微阻力，经30 s后取出(如有血迹不用，24 h后重取)，放入原Ep管中，即刻进行重量测量后将Ep管封口，放入低温冰箱(MDF-382E SANYO Electric Co，Ltd JAPAN)内，-80度超低温保存。此时可计算出GCF的量。(2)样本的生化分析：样本在室温下解冻，每管加入80 μl样本缓冲液，室温摇床中(150±20) r/min放置l h，4 ℃、1000 r/min离心10 min(DGL-16高速离心机、上海安宁科学仪器厂)，取上清液备用。夹心法 ELISA检测 TNF-α试剂盒(深圳晶美生物工程有限公司)，严格按照操作步骤进行，450 nm酶标仪(MICROPLATE READER US)读OD值，通过绘制标准曲线测出TNF-α的浓度。
　　1.3 统计学分析
　　各指标以受试牙为观察单位，所有资料利用SPSS12.0统计分析软件进行统计分析，组内修复前后纵向比较用配对t检验，组间横向比较用t检验。
　　2 结 果
　　镍铬合金组PFM修复后6个月时，其临床指标(GCD)和GCF指标(GCF的量、TNF-α的浓度)与修复前相比差异有统计学意义(P<0.05)。金铂合金组PFM修复后6个月其各项指标与修复前相比差异均无统计学意义(P>0.05，表1)。
　　镍铬合金组与金铂合金组修复前各项指标之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)，修复后6个月时两组临床指标和GCF指标之间差异均有统计学意义(P<0.05，表1)。表1 不同时期不同材料PFM修复的牙齿临床指标和GCF指标的比较(略)注：与修复前镍铬合金组比较，aP<0.05;与修复后镍铬合金组比较，bP<0.05。
　　3 讨 论
　　3.1 龈沟液的产生及其量的变化

　　在牙颈部，游离龈的上皮衬里和牙齿之间形成“v”形的龈沟，1959年Brill[3]证实在人的龈沟内有龈沟液的存在，并认为龈沟液是一种炎性渗出液。Pashly[4]提出炎症早期龈沟液的产生过程是由渗透梯度所介导的，菌斑中的微生物产生一定量的大分子产物，这些产物可扩散而聚集于基底膜处，从而产生持续的渗透梯度，形成GCF的流动。GCF的产生是由于龈沟上皮具有通透性，液体从龈沟上皮下结缔组织中的毛细血管渗透到牙龈组织，形成细胞间液，然后又通过牙龈组织中的淋巴管形成回流，当毛细血管的渗透大于淋巴管的回流时，液体就发生聚集，形成水肿，或者离开组织进入龋沟形成GCF。龈沟液来自局部微循环和结缔组织间液，牙龈在健康状态下仅有少量龈沟液存在，在炎症状态时，血管通透性增加，沟内上皮间隙增宽，龈沟液的量及其成分也随之发生变化。许多研究[5]表明牙龈炎症与GCF量呈正相关。本研究结果显示，镍铬合金组修复6个月后GCF的量与修复前比较差异有统计学意义(P<0.05)，而金铂合金组GCF的量虽有增加但差异无统计学意义，这表明镍铬合金对牙龈组织的影响是客观存在的。这与临床监测指标GCD的变化相一致。
　　3.2 TNF-α水平的变化
　　TNF-α是参与牙周炎症的一种重要的炎症因子。部分学者[6-7]的研究发现，TNF-α参与牙周炎症反应，与牙周组织破坏有关。TNF-α能刺激骨吸收及抑制骨形成 .也是刺激前列腺素及蛋白酶产生的主要因子，它与牙周病变中的结缔组织破坏及骨吸收有关[7]。何惠明等[8]动物实验结果表明，钴铬合金和镍铬合金在第1个月和第6个月均引起 TNF-α分泌的增加，并且随着时间的延长，各种金属之间表现出材料差异性，说明不同材料对于细胞因子分泌的影响是不同的。关于镍元素的生物学特性近年来已有较广泛研究，Wataha等[9]将巨噬细胞与 5种不同的金属离子(金、银、铜、汞、镍)共同培养，发现镍离子使得 TNF-α水平升高，并且随着脂多糖的增加，5种金属离子中只有镍使得 TNF-α水平增加，这证明镍有明显的致炎能力。另外一项体内实验研究表明，临床合格的镍铬合金烤瓷冠修复体戴用 6～8个月后，患者龈沟液中TNF-α含量明显高于空白对照组，说明镍铬合金烤瓷冠对患牙牙周组织有不利影响[10]。本研究结果表明，镍铬合金组PFM戴用6个月后龈沟液内TNF-α的浓度高于修复前(P<0.05)，而金铂合金组TNF-α浓度虽有升高但差异无显著性意义(P>0.05)，进一步印证镍铬合金烤瓷冠对牙周组织不利，而金铂合金则无大影响。
　　PFM 修复对牙周的影响有很多的因素，如冠边缘密合度、冠边缘位置、恢复牙冠的轴面外形突度、牙体预备情况、粘固剂等[11]，其中对于在相同的条件下，内冠的不同材料对患者的牙周组织健康是否有影响，一直是有许多争议的问题。而在我们的研究中PFM戴用6个月后镍铬合金组GCD、 GCF的量、TNF-α的浓度与修复前比较均有显著性差异，而金铂合金烤瓷冠各项指标与正常牙龈无差异，这一结果和临床观察相吻合。金铂合金被为生物相容性较好的合金，因Au本身是惰性金属，对局部的炎症性刺激很小，所以烤瓷修复时应尽量选用贵金属作为内冠材料以尽量减少对牙周的刺激。
　　【参考文献】
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