血清CEA水平与EGFR基因突变在复发晚期非小细胞肺癌中的相关性

          目的：探讨复发的晚期NSCLC EGFR基因突变率与临床基线特征和血清CEA表达水平之 间的关系。 方法：收集治疗后复发的晚期NSCLC患者102例，ADx-ARMS法检测患者组织标本中EGFR 29种突变，电化学发光法检测血清CEA水平。

          结果：102例复发的晚期NSCLC患者中．EGFR总突变 率为60.8%，其中女性显著高于男性(X2= 11.868，P=0.001)；腺癌高于其他组织学类型(X2：6.002，P=0.014)；非吸烟患者显著高于吸烟患者(X2= 8.502，P=0.004)；血清CEA≥5.0 ng/mL时显著高于血清 CEA< 5.0 ng/mL( X2= 22.543，P=0.000)。多变量Logistic分析发现复发时血清CEA表达水平与EGFR基因突变呈正相关(P= 0.002)。

          结论：对于复发的晚期NSCLC，EGFR突变率与血清CEA的表达水平 明显相关，血清CEA表达水平是EGFR基因突变的独立预测因素。血清CEA水平可作为难以获得组织的复发的晚期NSCLC患者判所ECFR基因突变的一种参考因素。 
          关键词ECFR基因突变；癌胚抗原；复发的非小细胞肺癌 表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermaj vowch factor receptor tyrosine kinaseinhibitor，EGFR-TKI)，包括吉非替尼和厄洛替尼等，对非小细胞肺癌( non-small cell lung cancer， NSCLC)有较好的抗肿瘤作用。多中心临床试验发 现EGFR突变阳性NSCLC患者使用EGFR-TKI治 疗客观有效率可超过700-/0[1]。EGFR突变现在已经成为NSCLC患者使用EGFR-TKI药物关键的疗效 预测指标，然而，大部分患者经过治疗后难以二次获得组织，加上血浆中检测EGFR突变目前没有统一的方法，且各种方法检测得出的阳性率相差甚远[2-3]，费用高，以及EGFR基因突变检测对肿瘤组织取材、设备、方法和质量控制等方面的要求较 高，所以，对于晚期NSCLC患者复发时在临床上较 难获得EGFR突变结果。临床医师主要选择那些具有特殊临床特征的患者进行EGFR-TKI靶向治 疗，如不吸烟者、女性、肺腺癌患者等。
          近年来有研究显示，血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen， CEA)水平可以作为EGFR-TKI靶向治疗NSCLC
患者疗效的预测因子[4]，但其原因和机制尚未明 确。本研究分析了在复发的晚期NSCLC患者 中．EGFR基因突变与患者的临床特征以及血清 CEA的水平之间的关系。 
          1资料与方法 
          1.1 一般资料 收集2010年1月21日至2014年5月20日在石河子大学附属医院就诊的 晚期复发的NSCLC患者102例，其中男66例，女36例。年龄44 - 85岁，中位年龄68岁。组织学类型依据2004年世界卫生组织(WHO)细胞分类法，其中腺癌77例，鳞癌25例；非吸烟患者 54例，吸烟患者48例。分析的临床特征变量包括： 年龄、性别、吸烟史、组织学类型、血清CEA水平。 
          入组标准：(1)经病理学或细胞学确诊为NSCLC； (2)治疗后又复发或进展的NSCLC患者；(3)可以收集到病理组织标本及血标本的NSCLC忠者；(4)所有患者人组时均签署知情同意书。 排除标准： (1)资料不完善者；(2)标本达不到EGFR基因突 变检测要求。 
          1.2检测方法 收集NSCLC患者的组织标本并 用100-/0甲醛固定和石蜡包埋。使用ADx-ARMSEGFR基因29种突变检测试剂盒检测EGFR基因
          29种突变（购自AmoyDx生物医药公司）。所有患者在治疗后复发时抽取清晨空腹静脉血3mL，分离血清，采用电化学发光免疫测定法检测血清CEA浓度，严格按仪器和试剂说明书操作，以5.0 ng/mL为正常值上限。 
          1.3 统计学方法 统计学处理采用SPSS 17.0统 计软件，率的比较采用xz检验和Fisher精确检验；临床特征与EGFR基因突变之间的状态的相关性 研究采用Logistic回归。检验水准o【=0.05。
           2结果
          2.1 EGFR基因突变状态 102例患者中检测到ECFR基因突变患者62例，其中21号外显子L858R突变30例，19号外显子19-Del突变22例，20号外显子20-lins突变4例，19号外显子19-Del突变合并20号外显子T790M突变3例．20号外显子T790M突变3例。 2.2临床特征与EGFR基因突变状态之间的美系102例NSCLC患者的临床特征与EGFR基因突 变状态之间关系见表1，从表中我们可以看出女 性、不吸烟、腺癌、血清CEA水平>5 ng/mL时突变率更高。 表1临床病理特征与EGFR突变率的关系
         

          2.3 ECFR基因突变的状态与患者疾病复发 时血清CEA之间的关系 EGFR基因的突变率随 着血清CEA水平的不断升高而增加，CEA<5 ng/mL,5 ng/mL≤CEA< 20 ng/mL, CEA≥20 ng/mL的EGFR突变率分别为43%，660-/0，780-/0 (X2=8.446，P=0.015)。见图1。 CEA <5 5《 CEA <20 CEA≥ 20
          图1 EGFR基因突变阴性或阳性在不同血清CEA水平中 的比例 
          2.4对EGFR基因突变预测因子的多因素分析血清CEA水平是EGFR基因突变的独立预测 因子(P= 0.002)。预测准确率由block0的60. 80-/0上升到75.50-/0。说明新变量的引入对改善模型预测效果有意义。见表2。 
          2.5 血清CEA对EGFR基因突变状态的预测价 值本实验中血清CEA对EGFR基因突变状态的预测的灵敏度和特异度分别为80.60-/0和52.5%：阳性预测值和阴性预测值分别为72.50-/0相63.60-/0。 
          3讨论
          EGFR-TKI治疗NSCLC的机制是阻止酪氨酸 
          表2 EGFR基因突变与临床病理特征关系的Logistic
          多因素分析 残基的磷酸化，进而阻断ECFR信号通路的转导，抑制肿瘤的增殖、转移、血管生成等一系列肿瘤细 胞生物活动。以往的临床研究显示EGFR-TKI在 EGFR突变的人群中可以显示出更好的疗效[1]。目前临床上在使用EGFR-TKI治疗NSCLC患者时， 首先对其肿瘤标本进行ECFR基因突变检测。但大部分患者在经过治疗后复发时难以二次获得组 织，加上血浆中检测EGFR突变目前没有统一的 方法，且各种方法检测得出的阳性率相差甚远[2-3]． 费用高，以及EGFR基因突变检测对肿瘤组织取 材、检测方法、实验室条件、样本要求、价格等因素使其临床推广受限，所以，对于晚期NSCLC患者复发时在临床上较难获得EGFR突变结果。因此，寻 找可能替代或辅助ECFR突变检测的生物标志物 具有非常重要的临床价值。 CEA在NSCLC中的作用在19世纪70年代被 公布，是早用于NSCLC的肿瘤标志物之一。
血清CEA表达水平与NSCLC疗效以及患者预后 有关。
          目前的研究结果显示，血清CEA水平高的患 者比那些血清CEA水平正常的患者对EGFR-TKI更敏感[4]。但发生这神现象的具体原因尚不明确。 相反，那些经治疗后复发的患者血清CEA水平常 常升高，尽管在治疗之前血清CEA水平可能正常。由此推断EGFR基因突变可能与血清CEA之间存在着某种联系。本研究主要探讨在复发的非小细胞肺癌患者中，EGFR基因突变和血清CEA水平之间的关系。 本研究结果显示，在晚期复发的NSCLC患者中，女性、组织类型、不吸烟的群体EGFR突 变率更高，与以往的研究结果相同[5]。本研究中当血清CEA≥5 ng/mL时EGFR基因的突变率比血清CEA<5 ng/mL时明显升高。EGFR基因突变率 随着血清CEA水平的升高而升高。值得注意的是， 当血清CEA≥20 ng/mL时，EGFR基因突变率高达78%。另外，经过Logistic多因素分析发现，血清 CEA表达水平与EGFR基因突变独立相关。 CEA的具体功能目前知之甚少，Ordonez等[s]的研究显示，CEA的过表达可以防止肿瘤细胞发 生失巢凋亡现象和抑制细胞的死亡。EGFR酪氨酸 激酶区域的突变已经被发现与NSCLC患者对吉非替尼的敏感性有关：址。EGFR突变可以导致其酪氨 酸激酶区域的持续磷酸化，可以导致其下游分子 如Akt和STAT 3的掎续活化。 另外，目前有研究显示Akt和STAT 3在EGFR突变的肿瘤细胞的抗 凋亡过程中发挥着重要的作用。本研究假定EGFR突变导致的信号通路的持续激活可以刺激抗凋亡机制的激活。 因此，高表达的CEA蛋白作为一种抗凋亡的中介可能会在EGFR突变的患者中被检测到。
总之，本研究结果显示，在NSCLC患者中EGFR基因突变和血清CEA之间存在着重要的联系，EGFR基因突变率会随着血清CEA表达水平的升高而增高。因此，在没有条件获得EGFR基因突变的情况下可以根据患者血清CEA的表达水平 尝试使用EGFR-TKI。然而，本研究由于样本量较 少可能存在一定的限制，想要阐明存在于该现象 背后的可能分子机制还有待进一步的研究。 
          4参考文献 
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          【收稿：2014-04-13编辑：黄月薪）