自动组织脱水机的应用体会

【摘要】 目的：阐述应用自动组织脱水机处理标本比手工处理标本切片质量显著提高。方法：设定专用程序应用自动组织脱水机处理标本。结果：标本处理适当，组织切片更薄，厚薄均匀，染色结果更清晰。结论：切片质量显著提高，故应用自动组织脱水机处理优于手工处理。

【关键词】 自动组织脱水机；标本；手工


　　随着现代病理技术的发展，对病理切片的质量要求越来越高。传统的手工组织处理由于费时、费力，且对组织的脱水不够而造成切片质量差，以及许多意外因素不能充分保证脱水的正常进行而逐渐被自动脱水机所取代。我院自2004年至今使用ShandonExcwlsior自动组织脱水机，标本的处理效果明显改观，切片质量显著提高，现介绍如下。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料 Shandon Excwlsior自动组织脱水机，附塑料脱水篮一只可容222个包埋盒，塑料包埋盒。

　　1.2 试剂 15%中性甲醛固定液、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、乙醇、二甲苯、石蜡(熔点62℃～65℃)。

　　1.3 处理过程 组织取材时，将小标本(如内窥镜及穿刺组织、较小活检组织)用擦镜纸包好，大标本取材2 cm×1 cm×0.3 cm，置于写有检验号码的塑料包埋盒内，放入组织篮，将组织篮置于反应室，关闭透明盖并锁上，即按所需程序开始进行组织处理，处理过程约为12 h左右。其后经过，补充固定：15%中性甲醛两道，各1 h,温度为35℃，设置加压、搅拌；梯度酒精脱水：75%乙醇室温1 h,85%乙醇室温1 h,95%乙醇两道室温各1 h,乙醇两道室温各50 min。末道乙醇设置加压、搅拌；透明：三道二甲苯室温各30 min，每道均设置加压、搅拌；浸蜡：1、2两道石蜡各40 min，第3道石蜡1 h,温度均为62℃，末道设置真空、加压、搅拌。

　　2 结果标本处理适当，组织切片更薄，可达2 μm～3 μm，柔软、厚薄均匀。对较硬的组织如：宫颈、皮肤等及某些难切组织如脂肪瘤等，也能切出完整切片。染色结果更清晰(尤其是细胞核的染色)，避免了因组织处理不当造成的胞核发灰现象。

　　图1 手工脱水处理：乳腺纤维腺瘤，组织较硬，脱水稍不透，示切片较完整，组织结构和细胞形态较清晰HE×250（略）

　　图2 机器脱水处理：乳腺纤维腺瘤，组织处理适当，示切片完整，组织结构和细胞形态清晰HE×250（略）

　　3 讨论

　　3.1 全自动组织脱水机的优越性

　　3.1.1 容量大 一次可处理200多个组织块，可以满足大多数医院的需求。

　　3.1.2 全封闭、自动抽真空、自动加温 使工作室呈负压，使组织与各个液体的交换更加完全，从而利于组织脱水、透明及浸蜡。以往脱水机对皮肤、脂肪等组织脱水往往不够，造成切片不完整、破碎，而对于细胞丰富的组织，如淋巴结等，使用Shandon全自动组织脱水机后，再配以锋利的刀片则可以切出1 μm～2 μm厚度的切片，不但可以满足对切片质量控制的要求，还有利于诊断医师对疾病的诊断。

3.1.3 安全性好 以往的脱水机在程序转换时，是机器带动组织标本移位。当遇到某些意外原因(如停电)时，会导致标本悬挂，离开液面暴露在空气中，尤其是运行到高浓度酒精及二甲苯这些环节时，将使标本干枯、变形以至硬脆。不仅给制片带来困难，而且使诊断难度加大，甚至无法诊断，而该机运行方式是组织标本不动，试剂靠真空泵进行泵进泵出依次运转，当遇突发事件而使程序不能继续运行时，该机将使该试剂保留于工作室内，避免组织受损，降低医疗纠纷的发生率。

　　3.1.4 环保性好 一般脱水机由于其密封性差，试剂易于挥发，尤其是二甲苯弥散在空气中，对工作人员的身体损害非常大，而该机由于采用全封闭设计，且具有异味自动抽吸功能，大限度的防止了试剂的挥发，不但保证了试剂的纯度，而且还避免了科室的空气污染。

　　3.1.5 操作方便、节约试剂 该机具有脱水、试剂轮换同步进行功能，从而避免了人工更换和再灌注试剂的麻烦，既节省时间，又保障了工作人员的健康与安全，同时，Shandon全自动脱水机具有酒精的比重自动监测功能，通过测量缸酒精的比重，可以检测这一缸陈旧酒精的水含量，这种方法不但能保证脱水质量，而且还能延长试剂寿命，节省试剂，更有利于切片质量控制。

　　3.2 体会 在试剂方面，道程序用15%甲醛对标本进行再次固定，使标本的固定效果更好，更有利于以后的脱水、透明和浸蜡。酒精脱水的初级浓度为75%，而后依次增高。使组织中的水分依次被置换出来。不至于因酒精的浓度过低或过高而使脱水不。透明剂仍选用二甲苯，因其与脱水剂和石蜡兼容性好，对组织染色影响较小。在脱水过程中，为防止从缸向后面一步步带试剂问题，我们采用每一种试剂后一步都加压、搅拌，组织在反应室内呈现一种负压状态，使反应室内的试剂全部排净，而达到试剂延长使用的目的。为保证标本固定充分，故在15%甲醛固定液中均加温度35℃处理组织，因在加温固定液中能使组织硬度增加，便于制片，使细胞半液体(胶体)变为半固体状(凝胶)对组织有固化作用。在三道二甲苯透明过程中，为了保证透明浸蜡的充分，在此过程中均使用加压、搅拌，但必须注意三道二甲苯各设置30 min，即可达到透明效果，不宜过长，使组织变脆。在组织浸蜡的3缸石蜡中温度不可过高，以60℃～65℃为佳。我院使用Shandon全自动组织脱水机后，在工作中不断学习、摸索，在制片过程中强调各个环节注重每个细节，使标本的处理效果明显改观，切片质量显著提高，给常规工作也带来了方便。

【参考文献】
　　［1］ 李泳，刘洋，吴小青.全自动密闭式组织脱水机操作方法的改进［J］.诊断病理学杂志，2000，7：70.

　　［2］ 吉耘，马恒辉，孙桂勤，等.全自动密闭式组织脱水机的使用改进［J］.中华病理学杂志，2002，Vo131，No.3.

　　［3］ 王伯伝，李玉松，黄高异，等.病理学技术［M］.北京：人民出版社.