CD44v6在上皮性卵巢肿瘤中的表达及临床意义

作者：严瑞兰　辛晓燕　王健　王德堂
　　【关键词】 CD44v6;卵巢肿瘤;免疫组织化学

　　摘 要:目的 探讨上皮性卵巢肿瘤中CD44v6的表达及临床意义. 方法 采用SABC免疫组织化学方法，检测了72例上皮性卵巢肿瘤中CD44v6的表达状况. 结果 恶性卵巢肿瘤、交界性肿瘤及良性肿瘤中CD44v6的表达分别为44.4%，20.0%和11.8%.恶性卵巢肿瘤中CD44v6的表达较良性肿瘤明显增高(P<0.05)，恶性肿瘤中有淋巴结转移者的CD44v6表达(67.0%)与无淋巴结转移者(33.0%)相比有显著差异(P<0.05).CD44v6高表达患者的生存期缩短.在恶性卵巢肿瘤不同病理分级及临床分期间CD44v6表达无明显差异(P>0.05). 结论 CD44v6在上皮性恶性卵巢肿瘤中的发生及淋巴结转移过程中可能起重要作用，并有望成为判断患者预后的有效指标.

　　Keywards:CD44v6;ovarian neoplasm;immunohis-tochemistry

　　Abstract:AIM To examine the ex[x]pression of CD44v6in ovarian tumor and to explore its relationship with occurrence of ovarian tumor.METHODS CD44v6ex[x]pression in72samples of ovarian tumor was observed by SABC immunohis-tochemical staining.RESULTS The positive rates of CD44v6ex[x]pression among malignant，borderline and benign tumors were44.4%，20.0%and11.8%respectively.The　CD44v6ex[x]pression in malignant was，obviously higher than that in benign tumor(P<0.05).Lymphonodus me[x]tastasis of ovarian cancer had good relation to CD44v6ex[x]pression(P<0.05).The patients have been followed up for3years.In case with CD44v6high ex[x]pression，the prognosis would be poor.CD44v6ex[x]pression was not related to clinical stages and pathological grades(P>0.05).CONCLUSION CD44v6might be involved in the development and me[x]tastasis of malignant ovarian tumor，and might serve as a prognostic marker of malignant ovarian tumor.

　　0 引言

　　CD44(Cluster of differentiation，CD)是一种分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白，属于未分类的粘附分子，主要参与细胞-细胞、细胞-基质之间特异性粘连过程[1] .其变异体CD44v6与人类恶性肿瘤的发生及转移密切相关[2，3] .我们采用免疫组化方法对上皮性卵巢肿瘤中CD44v6的表达进行检测，以探讨CD44v6在上皮性卵巢肿瘤中生长、分化及转移方面的临床意义.

　　1 材料和方法
　　1.1 材料 ①标本:1990-01/1998-12西京医院病理科保存的卵巢恶性、交界性和良性肿瘤的蜡块标本.标本均经40g?L-1 甲醛固定，常规石蜡包埋，连续切片(厚4μm).恶性肿瘤45例，年龄18～71(平均44.2)岁，术前均未接受过化疗或放疗.其中浆液性囊腺癌36例，粘液性囊腺癌5例，子宫内膜样癌4例.按FIGO分期标准，I期和II期归入早期共9例，III期和IV期归入晚期共36例.交界性卵巢肿瘤10(交界性粘液性囊腺瘤5，交界性浆液性囊腺瘤5)例，年龄34～62(平均41.6)岁.良性卵巢肿瘤17(浆液性囊腺瘤11，粘液性囊腺瘤6)例，年龄23～67(平均40.4)岁.选择同期因子宫肌瘤而手术切除的8例正常卵巢组织作为对照;②试剂小鼠抗人CD44v6蛋白mAb为美国Santa Craz Biotechology Inc产品，SABC kit为武汉博士德公司产品. 1.2 方法 ①SABC免疫组化染色:参照SABC kit中产品使用说明书进行.抗体工作浓度为1∶100.以PBS代替抗体作为阴性对照，阳性对照采用已知的CD44v6阳性切片;②判定标准:由两名医师在不知道任何临床和病理资料的情况下，根据CD44v6阳性细胞所占的比例判定:阳性细胞占5%～50%者定为阳性(+);大于50%者为强阳性(++);小于5%者为阴性(-).

　　统计学处理:采用χ2 检验.

　　2 结果

　　2.1 上皮性卵巢肿瘤中CD44v6的表达 CD44v6阳性物质呈棕黄色颗粒状，主要定位于肿瘤细胞的胞膜、胞质或(和)胞核，呈弥漫性或局灶性分布(Fig1).恶性肿瘤CD44v6的表达率明显高于良性肿瘤(P<0.05)，CD44v6在交界性肿瘤和良性肿瘤中的表达未见明显差别(P>0.05，Tab1).此外，我们在8例正常卵巢组织中未发现有CD44v6表达.

　　图1 CD44v6在卵巢浆液性囊腺癌中表达　略
　　表1 上皮性卵巢肿瘤中CD44v6的表达　略
　　2.2 CD44v6表达与临床病理指标的关系 在恶性肿瘤中有淋巴结转移的CD44v6的表达较无淋巴结转移者明显增高(P<0.05)，不同病理分级及不同临床分期的恶性肿瘤中CD44v6的表达无明显差异 (P>0.05).本资料中因除浆液性囊腺癌外，其他类型较少，故未进行不同病理类型间的统计学处理. 2.3 CD44v6在恶性卵巢肿瘤中的表达与患者预后的关系 在恶性卵巢肿瘤45例中，有完整随访资料者29例.其中术后3a内死亡16例，其CD44v6表达率为62.0%(10/16)，存活期大于3a者的CD44v6表达率为23.0%(3/13)，二者有明显差异(P<0.05，Tab2).

　　表2 恶性卵巢肿瘤CD44v6表达与临床病理指标的关系　略
　　3 讨论

　　人类CD44基因位于11号染色体短臂上，有20个高度保守的外显子.CD44基因外显子按其表达方式分为两种类型:一种是组成型外显子，其中转录片段存在于所有CD44转录子中，称为标准型CD44(CD44s).另一种是V区变异型外显子，含有V区外显子的CD44转录子统称为CD44拼接变异体(CD44v).目前已发现10多种CD44v，其中CD44v6与肿瘤的关系为引人注目.近年来的研究表明，CD44v6在胃癌、结肠癌及食管癌等多种恶性肿瘤中高表达.

　　Kamura等[4] 应用免疫组化方法分析了43对原发和复发卵巢癌中CD44v6和p53的表达，结果表明复发性卵巢癌中，CD44v6和p53表达较原发癌显著增高.提示复发性卵巢癌可能表现出更强的恶性潜能.Yamane等[2] 对结、直肠癌患者血清CD44v6水平及肿瘤组织CD44v6表达进行了免疫组化分析，发现肿瘤组织中CD44v6表达及CD44v6血清水平与淋巴结转移密切相关，CD44v6阳性表达患者的血清CD44v6水平也明显高于CD44v6阴性者，同时5a存活率降低.Streit等[3] 也发现CD44v6的表达与肿瘤的转移有关，但也有相反的报道[5] .另有学者的研究表明，宫颈癌和乳腺癌中CD44v6的表达与预后无关[6，7] .

　　本结果恶性上皮性卵巢肿瘤中CD44v6的表达明显高于良性肿瘤，在正常卵巢中未见有CD44v6表达，表明CD44v6参与了恶性上皮性卵巢肿瘤的发生过程.我们在对CD44v6表达与恶性肿瘤中有无淋巴结转移的关系检查结果表明，有淋巴结转移者的CD44v6的表达较无淋巴结转移者明显增高(P<0.05).推测CD44v6高表达的肿瘤细胞可能通过激活淋巴细胞，获得淋巴细胞的“伪装”，逃避人体免疫系统的识别和杀伤，更易进入淋巴结，形成转移[8] .我们发现不同临床分期和不同病理分级间CD44v6的表达无明显差异，与Carbognani等[9] 对非小细胞肺癌的研究结果相似.我们的随访资料表明，CD44v6高表达患者的预后较差(P<0.05)，与文献报道一致[10] ，说明CD44v6的表达对判断上皮性恶性卵巢肿瘤患者的预后有一定的参考价值.

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