肝卵圆细胞在肝纤维化中的研究现状

        肝纤维化是肝脏在遭受各种因素侵袭后导致慢性肝损伤后修复的一种表现，它和其他很多组织损伤修复的基础机制极其相似，如皮肤、肺和肾脏的纤维化修复。现在大多数的研究者都认为，肝纤维化是一个动态变化的过程，其本质是肝基质成分合成增加与降解失衡的结果[1]。在过去的15年研究中人们发现，在肝损害被终止后，肝纤维化是个可逆的过程。这些发现为笔者了解肝病的发生机制，从而制定新的治疗方法提供了重要基础。　　

        肝脏损害后的修复机制中，肝干细胞修复是近年来的一个研究热点，肝卵圆细胞作为肝干细胞的一份子，在肝纤维化的损伤修复中发挥着重要作用，本文将就肝卵圆细胞及其在肝纤维化中的研究现状进行综述。 
        1　肝卵圆细胞　　

        肝脏作为人体内具有较强再生能力的器官之一，在部分肝脏被切除后，通过肝实质细胞增殖，能够在较短时间内完成修复再生。但当肝功能严重受损、肝实质细胞不能完成再生修复时，肝干细胞增殖分化对于修复肝功能起着极其重要的作用。现已知的肝干细胞主要有肝卵圆细胞，小肝细胞和胚胎源性肝干细胞。它们主要参与肝细胞损伤后的修复与再生，并具有干细胞的特性。肝卵圆细胞作为肝干细胞中的一种，近年来，在急慢性肝损伤中的研究越来越广泛，取得了众多的研究成果。　　

        通常情况下，在正常的肝脏内并不能检测到卵圆细胞，只有当肝脏受到损害需要修复时，才能在肝脏中检测到卵圆细胞，被激活后的卵圆细胞具有分化为肝细胞和胆管细胞的能力[2]。通过研究人们发现，鉴别卵圆细胞除了可以通过细胞形态学以外，现有比较准确直观的方法是采用放射性同位素或基因标记技术跟踪，观察卵圆细胞在体内的演变、分化和分布。目前研究发现，卵圆细胞尚缺乏特异性标记物[3-4]，像现在应用较多的用来标记鉴别卵圆细胞的标记物，其特异性都不强，如OV-6、Thy-1，这些在造血干细胞中表达较多;CK-19原属于胆管细胞的标志物;AFP属于肝细胞标志物。虽然这些标记物缺乏特异性，但综合应用这些标记物也为人们研究卵圆细胞提供了更多的鉴别方法。如果能找到一种或几种特异性的卵圆细胞标记物，对于鉴别、纯化和应用卵圆细胞都会有巨大的帮助。　　

        卵圆细胞作为具有分化潜力的肝干细胞，其来源有两种观点：肝源性和非肝源性(骨髓造血干细胞转化)，但针对其来源并未有一个明确的结论，追溯其来源，或许为发现其特异性标记物同样有帮助。在卵圆细胞分化增殖的过程中，主要受细胞内和细胞外不同因素调控[5]。细胞外调控因素主要有表皮生长因子、肝细胞生长因子及神经递质等[6];细胞内主要有信号通路、转录因子等。细胞内调控机制复杂，目前研究主要集中在信号通路及转录因子方面，如经典的WNT信号通路对肝卵圆细胞的调控作用。尽管这些调控因素不断被发现，其调控机制也在不断完善，但目前相关的研究更多停留在活化或抑制卵圆细胞增殖分化，如胡荣林等[5]报道，TGF-β1能够通过调控 β连环素进而抑制卵圆细胞的体外增殖;或者是外在因素对其中某种调控因素或者调控路径的影响。而对于卵圆细胞定向分化为肝细胞和胆管细胞的机制及其影响因素的研究并不多见，现有研究也比较粗略，这些也需要进一步研究发现。 
        2　卵圆细胞与肝纤维　　

        肝纤维化作为一种常见的慢性肝脏疾病，若其在肝脏中反复发生，可导致肝脏结构的异常，纤维间隔及假小叶形成，终导致肝硬化。由于肝功能的下降，当伴有肝功能衰竭时就会产生危及生命的并发症，包括肝性脑病，凝血功能障碍，细菌感染，门脉高压并发症如腹水、静脉曲张破裂出血及肝肾综合征等。此外，肝硬化也是一种癌前状态，因此，需要系统的筛选以便早期发现肝癌。在发达国家中，过量饮酒是造成肝纤维化和肝硬化的一个主要因素，而在亚洲和非洲国家中，慢性乙型肝炎和丙肝则是主要的原因[7-8]。据2006年的全国乙型肝炎等相关疾病血清流行病学调查显示，我国是乙型肝炎病毒感染的高发区，成人乙型肝炎病毒感染率高达42.40%～80.77%，人群HBsAg携带率7.18%。而乙型肝炎病毒感染可以引起急慢性肝损伤，肝纤维化，严重者包括肝硬化及肝癌。此外，肥胖和2型糖尿病的发病率增加，以及非乙醇性脂肪肝疾病不断增多也成了肝纤维化发生的重要原因[9]。　　

正是因为急慢性肝病患者的数量不断增加，并且该疾病可能引发严重的后果，越来越多的研究者投入到肝纤维化的研究当中，利用肝纤维化在损害停止后有逆转的可能，不断探索新的治疗方法。现有的关于卵圆细胞治疗肝纤维化中的相关研究主要集中在两个方面：一是诱导、刺激肝内卵圆细胞向肝细胞、胆管细胞增殖分化，增强肝脏自身修复的能力，从而修复肝功能;二是通过体外培养增殖卵圆细胞，再通过门静脉注射、脾脏注射等方式移植到体内，终到达定位于肝脏，增强肝脏自我修复能力。目前，这些研究大多集中在动物实验上，其中一部分已应用于临床，越来越完善的治疗方法将具有很广的临床应用前景。刘波等[10]在其研究中发现，卵圆细胞经短暂体外培养扩增，经脾注射进入肝纤维化小鼠体内后，可定植于小鼠的肝脏内(主要聚集于汇管区)，并可缓解肝纤维化的进展，促进肝纤维的逆转。类似于这种通过注射干细胞达到促进肝损伤修复的方法也是目前众多干细胞移植手段的一种常用方法。　　

        中医中药在我国有着悠久的历史，其在治疗肝病上更有着独特的优势。有研究者曾就中药治疗肝纤维化做过一个101篇文献的回顾性研究，总结出使用频率较高的药物，如丹参、黄芪、柴胡、白术，归类则补虚药使用频率高，其次为活血化瘀药[11]。一些已经被证实有抗肝纤维化作用的单味中药的加入，能更有效的治疗肝纤维化这一病症[12]。这不仅为中药治疗肝纤维化的处方构成提供了理论依据，也使中医中药规范化治疗肝纤维化提供参考。鉴于卵圆细胞具有分化为肝细胞及胆管细胞的潜力，如何诱导其向着需要的方向分化也成为近年来的一个研究热点，已有不少国内的研究者利用在中医中药领域的优势，研究中药可以诱导肝卵圆细胞向肝细胞分化[13-14]。有研究者通过研究发现：大黄蠊虫丸通过下调NotchlmRNA的表达诱导卵圆细胞向肝细胞方向分化[15]。如果这些研究成果能完善到临床应用当中，不仅为治疗肝纤维化甚至肝硬化提供新的治疗思路，也为中医中药治疗肝病提供更多的基础理论支持。　　

        当急慢性肝损害没有得到有效控制，进展到肝功能衰竭时就进入了终末期肝病，目前，肝脏移植是终末期肝病有效的治疗方法[16]。我国作为一个肝病高发地区，每年都有很多的肝病患者需要肝移植手术，但由于供体的短缺、移植后的排斥反应、高昂的医疗费用等原因，极大地限制了肝移植在我国的开展，相较而言，干细胞移植在技术、费用、免疫排斥及后续治疗方面均有强大的优势。因此，关于这方面的研究也越来越多，而且临床治疗效果令人欣喜[17]，其中自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化失代偿期患者，具有明显缓解症状、安全性高等优点。肝干细胞移植不仅可以修复受损的肝功能，同时也为肝移植争取更多的时间，这也成为治疗终末期肝病一个新的思路[18]。作为肝干细胞移植细胞来源的重要组成者，肝卵圆细胞在体外连续传代培养还可保持干细胞的特性，故有学者提出肝卵圆细胞可能是自体肝干细胞的好来源[19]。 
        3　结语　　

        卵圆细胞作为近年来的一个研究热点，随着其基础研究越来越详细，在卵圆细胞分离、纯化、增殖等方面也越来越完善，但其在肝纤维化中的研究并不多见。现有研究已表明，肝纤维化作为急慢性肝病向肝硬化、肝癌进展的一个重要过程，存在逆转可能，如何通过诱导、刺激卵圆细胞分化、增殖，或者是通过移植卵圆细胞，达到修复肝损伤，恢复肝功能，阻断肝纤维化的进展，甚至逆转肝纤维化，都将成为笔者的研究课题。 
        4　参考文献 
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        [收稿日期：2013-12-09　编校：陈伟/郑英善]