Livin基因在口腔粘膜白斑与口腔癌中的表达

【摘要】 目的：探讨Livin基因基因在口腔粘膜白斑、口腔癌的表达相关性。方法：应用免疫组化(S-P)法检测Livin基因在48例口腔粘膜白斑(轻度增生l2例，中度增生l8例，重度增生l8例)、口腔癌32例中的表达。结果：在口腔粘膜白斑轻、中度不典型增生组织中Livin基因呈弱表达(1／12， 3／18)；在口腔粘膜白斑重度不典型增生中表达率明显增高(13／18，72．2％)，口腔癌中Livin基因表达率很高(29／32，90.6％)，口腔粘膜白斑的轻、中度不典型增生与重度不典型增生的表达比较有显著的意义(P<0.05)，但与癌的表达无显著意义(P>0.05)。结论：Livin基因的表达与增生的程度有关，Livin基因的表达可能与口腔癌的发生有关。

【关键词】 口腔粘膜白斑

　　凋亡抑制蛋白(IAP)是一类含众多成员的凋亡抑制蛋白家族，在抑制凋亡和促进肿瘤细胞增生中起着重要的作用。Livin是新发现的IAP家族成员之一，主要是通过和Caspase蛋白结合抑制其级联激活反应而发挥抗凋亡作用。已有研究表明Livin在多种肿瘤组织呈阳性表达，在肿瘤组织的增殖和凋亡过程中发挥重要作用［1］。由于Livin在一些肿瘤组织中呈特异表达，故而进一步研究它与肿瘤病理类型、分化程度以及化疗后对其表达的影响的关系，以此为临床的有效诊治提供依据。我们采用免疫组化方法，检测口腔粘膜白斑不典型增生的Livin基因蛋白的表达情况，并与口腔癌的表达情况进行对比，探讨Livin基因与白斑不典型增生恶性转化关系。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料来源：90例口腔组织蜡块取自我院及广东医学院附属医院病理科，为2000年至2006年手术切除或活检标本，其中口腔粘膜白斑48例，口腔癌32例，所有组织均经4％甲醛固定，常规石蜡包埋。

　　1.2 组织学分类：依据《诊断病理学》刘彤华主编标准将口腔粘膜白斑分为轻、中、重三类，其中轻度不典型增生12例，中度不典型增生18例，重度不典型增生18例，口腔癌32例。其中唇癌12例，舌癌13例，口底癌7例。

　　1.3 方 法

　　1.3.1 免疫组织化学方法：采用链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶连接(SP)免疫组织化学方法，抗Livin单克隆抗体及SP试剂盒，均为福州迈新生物技术开发公司产品。实验步骤按试剂盒说明书进行，用PBS代替一抗作为阴性对照。

　　1.3.2 结果判定：在组织切片中显示胞核或胞浆染为淡黄至黄棕色者为阳性细胞标志，将阳性细胞按其数量及显色强度分为3级：表达弱阳性(+)，即阳性细胞数<10％，显色强度为淡黄色或仅个别细胞呈黄至棕黄色染色；表达强阳性(+++)，即阳性细胞数>60％，多数细胞呈黄至棕黄色染色；表达中度阳性(++)，即阳性细胞数及显色强度介于弱阳性与强阳性之间。凡显色强度与背景无明显差别者为阴性。

　　1.4 统计学方法：采用X2检验。

　　2 结 果

　　Livin基因蛋白在口腔粘膜白斑与口腔癌中的表达，见表1。

　　表1 口腔粘膜白斑不同类型与口腔癌组织中Livin基因蛋白表达　略

　3 讨 论

　　凋亡抑制蛋白是一类内源性细胞凋亡抑制因子，在很多物种中起着抑制凋亡的作用，其过度的表达引起细胞凋亡不足与肿瘤的发生发展密切相关。Livin作为人类IAP家族的新成员，有明显的抗细胞凋亡作用，它主要通过与介导细胞凋亡的下游效应分子Caspase，即激活形式的Caspase3和Caspase7结合，并抑制其活性而发挥作用的。Livin与Caspase结合有高度的亲和性和特异性，这依赖于BIR(N端86—154)结构域的完整。BIR是一种新型的锌指结构，而Livin中BIR结构是抗凋亡活性所必需。如BIR结构域单个氨基酸发生突变可导致Livin与Caspase亲和力下降，使Livin的抗凋亡能力明显减低甚至消失［2，3］。Livin是近几年新发现的一类内源性细胞凋亡抑制因子，它含IAP家族特有的BIR和RING(C端环指结构)结构域。Livin在正常组织一般不表达或表达很低，但其在一些肿瘤系中却高表达，如黑色素瘤、胃肠癌、膀胱癌、乳腺癌、白血病及淋巴瘤等［3］。

　　我们用免疫组织化学方法，对80例口腔粘膜上皮恶性不同转化不同阶段的石蜡包埋标本Livin基因蛋白表达的检测。结果发现口腔粘膜白斑在轻、中度不典型增生组织中Livin基因蛋白表达率很低，口腔粘膜白斑重度不典型增生，Livin基因蛋白表达率明显上升，与口腔癌的Livin基因蛋白表达率相比无显著的差异，说明Livin基因蛋白表达在一定程度上与细胞的恶性倾向有关。可以推测重度不典型增生的口腔黏膜白斑内的Livin基因蛋白的表达，它们具有一定恶变的潜能。临床上对重度不典型增生的口腔黏膜白斑应高度重视，密切观察临床经过。



【参考文献】
　［1］ KASOF GM，COMES BC．Livin，a novel inhibitor of apoptosis protein family member［J］． Biol Chem，2001，276：3238-3246．

　　［2］ 张华东，袁守军，陈惠鹏．Livin一癌症治疗的新靶点［J］．中国药理学通报，2003，19(8)：845-847．

　　［3］ D Vucic, HR Stennicke, MT Pisabarro,et al.ML-IAP, a novel inhibitor of apoptosis that is preferentially expressed in human melanomas［J］. Curr Biol, 2000，10(21): 1359-1366.