Nycocard READERⅡ金标定量仪检测C

【关键词】 Nycocard检测仪；C

　　［摘要］ 目的：评价Nycocard READERⅡ型金标定量仪及其试剂检测C反应蛋白(CRP)的价值。方法：对Nycocard READERⅡ型金标定量仪及其试剂的主要性能进行了评价，内容包括重复性、准确性、线性、可比性和稳定性。结果：批内重复测定高、中、低值，CV≤5.5％，日间重复测定质控血清结果(23.55±0.83) mg/L，CV 3.5％；线性回归方程Y=0.995X+0.172，r=0.999；与特定蛋白分析仪和干化学分析仪作相关性分析，r值分别为0.995、0.981；全血与血清结果比值0.85～1.15；全血标本在缓冲液中保存90 min内结果均无多大变化。结论：Nycocard金标仪检测CRP具有良好的重复性和准确性，并且具有良好的线性和仪器的相关性，适合应用于临床常规工作。

　　［关键词］ Nycocard检测仪；C反应蛋白；金标法

　　血浆C反应蛋白(Creactive protein, CRP)是急性时相反应中重要的标志物之一，在各种急性和慢性感染、组织损伤、恶性肿瘤、手术创伤等时迅速升高，病变好转时又迅速降至正常［1］。Nycocard READERⅡ型定量仪是一种金标检测仪，可用于CRP的检测，具有微量用血、操作简便、快速定量等特点。为了了解它在实际应用中的效果，现对这台仪器以及其试剂作以下评估。

　　1　材料与方法

　　1.1　仪器　挪威AxisShield PoC AS公司生产的Nycocard READERⅡ型多功能全定量金标检测仪，美国BECKMANCOULTER IMMAGE特定蛋白分析仪，美国强生VITROS 250全自动干式生化分析仪。

　　1.2　试剂　挪威AxisShield PoC AS公司的配套试剂；作相关性分析时，IMMAGE所用的试剂为美国贝克曼库尔特公司配套试剂，VITROS 250所用的试剂为美国强生公司配套试剂。

　　1.3　标本　 阳性质控血清(批号：10121868)：由AxisShield PoC AS公司提供，CRP质控范围为(25±10) mg/L；收集本院门诊、急诊和住院患者的全血和血清标本；新鲜全血立即注入Nycocard金标定量仪的配套缓冲液中作测定。

　　1.4　检测方法原理　利用固相免疫双抗体夹心法原理，稀释后的样品加样于反应板，标本流过反应膜，CRP分子即被固定于膜的CRP特异性单克隆抗体所捕获，然后和随后加入的胶体金抗体缀合物相结合，未结合的金标本体，用洗涤液将其从膜上清除，膜下滤纸层将吸收过剩的液体，当标本中CRP达到病理水平时，膜上将出现紫红色，颜色的强度和CRP浓度成正比，用金标定量仪作定量测定。

　　1.5　评价方法　重复性测定：选取高、中、低值标本各1例，重复测定20次，观察批内精密度；采用阳性质控血清20天内每天测1次，观察其日间精密度;准确性测定：检测阳性质控血清，将检测结果与靶值相比较，观察偏差是否在允许误差范围内;线性检测：取高值CRP全血标本，用不同倍数稀释后，进行测定值与理论值相关性分析;对比实验：取40份Nycocard检测CRP＞5 mg/L的血清标本，每份标本在IMMAGE和VITROS 250上分别测定两次，比较测定结果的相关性;全血和血清标本所测结果的比较：取CRP高值病例的全血和血清标本20例，在CRP金标定量仪上作平行检测。计算全血CRP/血清CRP比值;稳定性实验：选择CRP含量各不相同的全血标本10例，在标本注入缓冲液后即时、20 min、40 min、60 min、90 min、120 min时各用Nycocard检测，观察保存时间对检测结果的影响。

　　1.6　统计学方法　线性回归和相关性分析均由SPSS 12.0统计软件完成
2　结果

　　2.1　重复性与准确性测定　批内CRP重复测定结果(±s)：高值(218.9±5.06) mg/L，CV 2.3％，中值(69.7±1.13) mg/L，CV 1.6％，低值(16.5±0.91) mg/L，CV 5.5％；日间CRP重复测定结果(±s)：(23.55±0.83) mg/L，CV 3.5％，检测结果均在质控范围内，显示该仪器精密度和准确性比较好。

　　2.2　线性检测　先在Nycocard上作3次测定，得CRP均值为220 mg/L。然后将全血用生理盐水作1/1、3/4、1/2、1/3、1/4、1/8、1/16原倍浓度的稀释，得到不同浓度CRP含量，将各稀释样品再作测定，结果显示其在13 mg/L～220 mg/L范围内呈良好的线性关系，回归方程为Y=0.995X+0.172(Y为测定值，X为理论值)，r=0.999(见表1)。

　　表1　Nycocard金标定量仪线性测定结果（略）

　　2.3　对比实验　Nycocard免疫渗滤与VITROS 250干化学法检测，结果表明，两法差异无显著性(P＞0.05)，设Nycocard所测结果为Y，VITROS 250所测结果为X，并对所测结果做直线回归分析Y=1.079X-1.550，r=0.981，n=40，提示两者呈良好的相关性；Nycocard免疫渗滤与IMMAGE免疫速率散射比浊法所测结果亦差异无显著性(P＞0.05)，回归方程 Y=0.975X+0.719，r=0.995，n=40，说明两者结果相符。

　　2.4　全血与血清标本结果的比较　20例比例比值范围为0.85～1.15，平均比值为0.975。提示全血标本与血清标本结果基本相符。

　　2.5　稳定性实验　因门急诊工作量大，有时采集全血标本后未能立即检测，故做此试验。结果说明90 min内重复测定结果均无多大变化，120 min时略有降低，但仍在高值范围内，见表2。

　　表2　全血标本在缓冲液中保存不同时间对结果的影响（略）

　　3　讨论

　　目前，CRP被为是有价值的急性时相反应蛋白，它的升高可以提示许多炎症事件的发生。随着许多灵敏、准确而简便的检测手段的相继问世，近年来对CRP的研究进展较快，它的测定广泛地应用于临床疾病的早期诊断及鉴别诊断［1］，特别是快速定量CRP检测在儿科疾病的诊断中得到较好的应用［2］。Nycocard READERⅡ型多功能全定量金标检测仪外型小巧，便于携带，既可标本随到随做，又适于床边检查，操作简便；而且定量测定，结果准确可靠，重复性好，变异系数小(CV≤5.5％)；全血和血清标本都可以检测，且结果相符；可测范围广，在CRP13 mg/L～220 mg/L内线性良好；全血标本在缓冲液中保存90 min内结果无多大变化；与美国BECKMANCOULTER IMMAGE特定蛋白分析仪和美国强生VITROS 250全自动干式生化分析仪相比较，所测结果差异无显著性(P＞0.05)且相关性好(r=0.995，0.981)。Nycocard特别适应儿科需求，用手指末梢微量全血，克服了儿童采血的困难，患儿易接受，且快速报告定量CRP结果，整个过程仅需3 min，能满足临床要求，在临床检测中显示出良好的应用前景。

　　参考文献：

　　［1］　周宓，潘柏申.C反应蛋白在临床应用中的进展［J］.国外医学临床生物化学与检验学分册,2005，26(1)：5657.

　　［2］　王佩菊,郭桂梅,肖丽.快速定量检测C反应蛋白在儿科的应用,2001，3(5)：583584.