子代孤独症与母亲基础性激素水平的关联性

         【摘要】 目的探讨孤独症患儿母亲与正常儿童母亲基础性激素水平的差异，以及母亲基础性激素 水平与孤独症症状严重程度的相关性。方法利用化学发光法对62例孤独症患儿母亲及29例正常儿童 母亲血清睾酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)、雄烯二酮(A)水平进行检测，并对孤独症组患儿分别进行孤独症诊断会谈问卷修订版( ADI-R)、孤独症诊断观察量表(ADOS)、中国韦氏儿童智力量表( C-WISC)／中国韦氏幼儿智力量表(C-WYCSI)、婴幼儿发育检查量表评估。结果孤独症组 母亲血清E2水平(35.00 pg/ml，IQR 27.00- 44.50)较正常对照组(48.00 pg/ml，IQR 30.00-59.50)低，差异有统计学意义(P= 0.03)，而孤独症组与对照组母亲血清T(0.29 ng/ml，IQR O．24 - 0.31；0.32。∥。l，IQR 0.23- 0.40)、P(0.20 nyml, IQR 0.19- 0.30; 0.20 ng/ml, IQR 0.10 -0. 30)、DHEA-S( 5.57 ymol/L, IQR 4.19 -7.12;4.95 Vmol/L,IQR 3.70- 7.11)，A(5.85 nmol/L, IQR 4.33 - 8.27; 6.23 nmoVL, IQR 4.48 -7. 16)、E2*/T(1.23，IQR O．93 - 1.94；1.27，IQR O．89-2.31)比较均差异无统计学意义；且孤独症患儿母亲血清E2低水平 与患儿性别、智商（或发育商）及ADI-R、ADOS评分无相关性。结论孤独症患儿母亲基础雌二醇水平降低，提示母亲低雌激素水平可能与孤独症发生有关。 
         【关键词】孤独症；性激素；雌激素；雌二醇 
         孤独症谱系障碍（孤独症）主要表现为社会交往和交流障碍、重复刻板行为及狭隘兴趣，可伴语言障碍或智力低下，男女患病比例约为4:1，其发病机制尚未明确。Baron-Cohen。11曾提出“极端男性化大脑(ex-treme male brain.EMB)”理论，认为孤独症患儿存在共情能力缺陷及系统化能力增强，且有研究发现孤独症 患儿存在类固醇激素水平异常心。 孤独症的发病可能存在关联。而孤独症是一类自幼起病的神经发育障碍性疾病，作为影响胎儿发育的重要 因素，母亲类固醇激素水平对子代孤独症的影响鲜有报道。本研究通过检测孤独症患儿母亲基础性激素水平，包括睾酮( testosterone，T)、雌二醇(estradiol，E2)、 孕酮( progesterone，P)、雄烯二酮(androstenedione．A)和硫酸脱氢表雄酮( dehydroepiandrosterone sulfate， DHEA-S)，旨在探讨孤独症患儿母亲性激素水平与子 代患病的关联性及其可能存在的临床意义。 
         对象与方法 
         一、对象 孤独症组：选取2014年5月至10月在本院儿童育行为中心初诊患儿，由两名专科医师进行不少于 -0 min的病史采集及临床行为观察，根据美国精神障享诊断统计手册第4版( DSM-IV)孤独症诊断标准诊牙，排除Rett综合征、脆性X染色体综合征、染色体疾 与、内分泌疾病、严重躯体疾病等。共纳入孤独症患儿 ，二例及其母亲62例，其中男孩55例，女孩7例，月龄二0．O - 122.0月，平均(46.1+18.5)月。 对照组：选取2014年5月至8月于本院进行健康二检的女性职工及其正常发育子女各29例，入组儿童习排除孤独症、智力障碍等发育障碍性疾病。其中男；夏13例，女孩16例，月龄20.0 - 168.0月，平均(86.9±一．4)月。 两组儿童母亲人组标准：①无精神疾病史；②无肥；三症、糖尿病、甲状腺功能亢进／甲状腺功能减低等内，泌疾病史或妇科内分泌疾病史；③无严重躯体疾病；有正常月经周期，非孕期或哺乳期女性；⑤抽血前至夕一个月未服用任何激素类药物（包括口服避孕药）。 
         二、组母亲均自愿参加并签署研究知情同意书，本研究 三中山大学伦理委员会审核批准。 
         三、方法 1.母亲基础性激素水平及血生化指标的检测：于 ；三期第2-5天采集入组儿童母亲清晨空腹静脉血4:1铃离血清后存于-80 0C待测。血脂检测采用日立 ≥自动生化分析仪，应用化学发光法检测胰岛素浓度墓国西门子公司centaur-XP全自动化学发光免疫分r彳仪）。应用化学发光酶免疫分析法（chemilumines-ent enzymelmmunoassay，CLEIA）测定血清A浓度（德西门子公司IMMULITE 2000全自动化学发光免疫 亍析仪，灵敏度为1.0 nmol/L）；应用化学发光微粒子 芎囊检测法(chemiluminescent microparticle immunoas-、a、-，CMIA)测定血清T、P、E2、DHEA-S浓度（美国雅
：三公司ARCHITECT i2000系统全自动免疫分杪i仪，检灵敏度分别为0.04 ng/ml、0.1 ng/ml、10 pg/ml、0.08
_mol/L）。 2．孤独症组患儿症状的评估：(1)评估方法：由经 ．二培训的本中心专业人员对患儿进行评估，以ADI-R、 1DOS分值评估孤独症核心症状严重性程度，C-WISC/．-WYCSI评估≥46月患儿智商，婴幼儿发育检查量表 j-沽<46月患儿发育商。(2)评估工具：①孤独症诊}会谈问卷修订版( ADI-R)／孤独疰诊断观察量表\DOS）：该半结构化评估工具由WPS出版并经YYi。．等修订中文版译本‘Ⅵ。本研究ADl-R总分包括社 兰互动异常(SOC)、非言语交流异常(NVC)及局限重夏刻板行为模式( RRB)三个模块的分数(记为mADI-1 6_。ADOS总分包括沟通(SC)及相互性社会互动 SS)模块得分。②中国韦氏儿童智力量表(C— "ISC)／中国韦氏幼儿智力量表(C-WYCSI)：C-WISC/，．ⅥYCSI分别以韦氏儿童智力量表修订本(WISC-- 及韦氏学前及初级小学智力量表(WPPSI)‘8为 蓝本经龚耀先等修订‘0。10 1。全量表智商由操作智商和
言语智商构成。③婴幼儿发育检查量表：根据Gesell等1974修订的发育诊断量表（即Gesell量表）由林传家等进行修i;T[II]，内容包括适应性行为、大运动、精细 动作、语言和个人一社交行为。 
         3．统计学处理：利用SPSS 17.0统计软件对数据进行统计分析。数据资料为连续型变量者，先进行正态 分布检验（Shapiro-Wilk检验），对服从正态分布者以平均数±标准差表示，采用独立样本￡检验比较组间差异；不服从正态分布者以中位数，四分位数间距(IQR)表汞，用Wilcoxon秩和检验比较组间差异。对孤独症 组母亲基础性激素水平与患儿mADI-R、ADOS得分进 行关联性分析，以Spearman相关系数表示。所有检验 均以P<0.05为差异有统计学意义。 结 果          
         一、两组儿童母亲一般资料及血生化指标的比较 孤独症组患儿母亲与对照组儿童母亲的怀孕年龄、月经周期、BMI指数均差异无统计学意义。两组儿童母亲血清CHOL、TRIG、HDL-C、LDL-C、IRI水平亦 无统计学差异：见表1： 注：BMT：体质指数；CHOL：总胆固醇；TRIG：甘油三酯；HDL-C：高密度脂蛋白胆固醇；LDI.-C：低密度脂蛋白胆固醇；IRI：空腹胰岛素。“统计描述表示为均数±标准差，统计量为t值。“统计描述表示为rp位数（四分 位数间距），统汁量为Z值 
         二、两组儿童母亲基础性激素水平的比较孤独症组母亲血清E2水平(35. 00 pg/ml, IQR27.00- 44. 50)较对照组(48. 00 pg/ml, IQR 30. 00 -59.50)低，差异有统计学意义(P= 0.030)。而孤独症组与对照组母亲血清T( 0.29 ng/ml,IQR 0.24 - 0.31； 0.32 nUml, IQR 0.23 -0.40)．P(0.20 ng/mI,lQR O.19- 0.30;0.20 ng/ml, IQR 0.10 -0.30). DHEV5(5.57 ymol/L,IQR4.19 - 7.12; 4.95 p.mol/L.. IQR 3.70-7.11) .A( 5.85 nmol/L, IQR 4.33 - 8.27; 6.23 nnioU
L,IQR 4.48 - 7.16) .E2*/T(1.23. IQR 0.93 -1.94;1.27 ,IQR 0.89 - 2.31)比较均差异无统汁学意义一见 图l、表2。 孤独症组男童与女童母亲血清E2水平(35.50pg/ml, lQR 27. 00 - 45. 00; 31.0 pg/ml, IQR 25. 00 -44.00; P= 0.476)、以及对照组男童母亲及女童母亲血清E2水平(53. 00 pg/ml, IQR 22. 50 - 67. 00;47.00 pg/ml，IQR 31.25 - 50.75；P= 0.497)均差异无统 计学意义。 表2 孤独症组与对照组母亲基础性激素水平比较 P= 0.030，图中横线分别表示两组中位数值 图1 孤独症组与对照组母亲血清E2水平比较
        

         三、孤独症组母亲基础雌二醇水平与患儿症状的 相关性分析 1．孤独症组中共37例患儿家长参与ADI-R问卷会谈，“社会互动异常”得分18.5+5.0（截止分=10），无口语者“沟通异常”得分10.9+2.1（截止分=7），有 口语者“沟通异常”得分15.4+4.5（截止分=8），“局限 重复刻板行为模式”得分5.3+2.1（截止分=3）。34例 患儿参与ADOS评估，“沟通”得分6.1+1.7(截止分=2)，“相互性社会互动”得分10.0+2.5（截止分=4）。 孤独症组母亲基础E2水平与患儿mADI-R、ADOS评 分的相关性分析差异无统计学意义（均P> 0.05）。
         见表3。 注：sOc：社会互动异常；NVC：非口语交流；RRB：重复兴趣及刻板行 为；sc.沟通；ss:相H性社会性互动 2.16例患儿参与C-WISC/ C-WYCSI测试，言语智商52.6+20.2，操作智商61.00+18.6，全量表智商52.6+20.5。20例患儿参与Cesell量表评估，“适应性行芳’ 发育商64.2+18.4，“大运动”发育商73.8+15.4，“精细 运动”发育商62.5+20.0，“语言”发育商45.3+ 15.1． “个人一社交行为”发育商58.0+15.4。分别以C-WISC'C-WYCSI测试全量表智商均数(52.6)及Gesell量表总发育商均数(64.2)为截点值，分为智商>52.6与≤52.6患儿组；发育商>64.2与≤64.2患儿组。智商>52.6与≤52.6患儿其母亲E2水平(45.00 pg/ml，IQPi26.00 - 56. 00; 32. 00 pg/ml, IQR 25. 50 - 48. 00; P=
0.490)，以及发育商>64.2与≤64.2患儿其母亲E2水 平( 35.00 pg/ml, IQR 27.00 - 38.00; 34.00 pg/ml, IQR
26.50- 89.50; P= 0.594)均差异无统计学意义。 讨 论 孤独症谱系障碍的病因和发病机制至今尚未明确，目前倾向于将其解释力一种由遗传因素和环境因素共同作用所导致的神经发育障碍性疾病12 li，而母体 宫内环境也可能因其对胎儿早期发育的重要作用对孤 独症的发病产生一定的影响。 
         本研究通过比较孤独症患儿及正常儿童母亲的五种性激素包括睾酮、雌二醇、孕酮、雄烯二酮、硫酸脱氢 表雄酮的基础水平，发现孤独症患儿母亲基础雌二醇 水平较正常儿童母亲低，并与患儿性别、智商（或发育 商）及症状严重程度无关，其它四种性激素水平则未 发现差异。本研究中孤独症组母亲平均年龄明显小于 对照组母亲，已有研究显示随着年龄的增长，雌二醇水平呈现持续下降趋势13，而平均年龄较小的孤独症组母亲雌二醇水平反而低于平均年龄较大的对照组，进 一步提示孤独症患儿母亲血清基础雌二醇水平存在明显降低二Ll等l -l研究发现孤独症患儿母亲睾酮水平 较正常儿童组高，而未发现雌二醇水平的差异，与本研究结果并不一致，可能与检测方法不同、研究对象年龄 差异等有关二雌二醇是雌激素的主要成分，是重要的神经类固 醇激素，已有越来越多的研究从不同角度提示雌激素 在脑和神经发育过程中的作用二有临床研究显示，使 用外源性雌激素可以防止绝经女性的认知功能退化；降低阿尔茨海默病的患病风险”，保护患者认知功能[16J成改善情绪‘”j。Ottowitz等协利用PET分析发 现分级输注外源性雌激素引起患者杏仁核与上中颞叶 皮质以及上、腹外侧、内侧前额叶皮质的功能连接增强。Kenna等1911,也发现雌激素可增强皮层一皮层下的交联作用以及皮层下区域间的功能连接二动物实验显 示雌激素可刺激神经突的生长、增加突触数目、促进树突分支和髓鞘形成[20]，在行为层面，与改善认知和社会功能有关21。
        

          体外实验发现，杏仁核神经元‘22_或 海马神经元L23]等培养基中加入173-E2均可增强原代细胞的生存能力和分化能力。而JList二4提出孤独症 的“连接不良假说( underconnecti,-it、t theon一)”认为，孤 独症患儿的神经生物学异常与局部神经连接的过度增 强和远距功能连接的减弱有关，有研究显示部分孤独 症患者存在杏仁核与颞叶皮层间连接减弱的现象‘：5]。 故本研究结果提示雌激素水平异常可能与孤独症的神 经连接不良有密切关联性。除此之外，雌激素还能增加脑源性神经营养因子( BDNF)[26]、催产素受体和乙酰胆碱受体的表达。2 7。，而后三者均与孤独症的发病亦有密切关系。14，28-29。 产前阶段是类固醇激素塑造大脑的重要时期，胎儿、母体、胎盘通过类固醇激素前体物质的交换共同构 成宫内激素环境，根据Phoenix“组构一激活假说”，类固醇激素在此期作用于中枢神经系统形成神经环路。而 胚胎发育过程中器官形成早期即受精后的第20 - 40天对基因和环境的改变非常敏感‘30]，在孤独症的发病中可能有重要作用。妊娠早期雌二醇则主要来自于母 『本[3'J，在妊娠第6-8周胎盘功能开始建立后开始增加F321，雌激素作为一种对脑和神经发育有重要作用的神经类固醇激素，其早期作用时间恰与胎儿神经胚形 成及大脑发育的关键期一致，因此，母亲低雌激素水平 可能作为一种不良环境因子，在产前胚胎发育早期即对胎儿的神经系统产生影响，可能与部分孤狃症的发 病有关，这也许可以为解释孤独症患病存在显著性别差异的成因提供新的线索。然而，鉴于本研究为回顾性研究，孤独症患儿母亲的基础雌激素水平并不能完 全复制母亲孕期的激素水平，尚需进一步前瞻性研究 并在基础实验水平加以验证。 
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(收稿日期：2015-02-16)
         （本文编辑：冯学泉）