IQ-200尿沉渣分析仪检测尿有形成分结果误判分析及对策

【摘要】  目的 分析IQ-200尿沉渣分析仪检测尿有形成分的影响因素，寻找导致其结果误判的原因及解决对策。方法 采用IQ-200尿沉渣分析仪和尿沉渣镜检对600例临床尿液标本进行检测，对尿中RBC、WBC、CAST、上皮细胞等检测结果进行比较，分析引起IQ-200尿沉渣分析仪结果误判的原因，建立复核标准。结果 IQ-200尿沉渣分析仪检测红细胞假阳性率为20.9%，白细胞假阳性率为11.3%，上皮细胞假阳性率为8.2%，管型假阳性率、假阴性率分别为24.5%、3.5%，结晶假阳性率为8.7%。一定量的结晶、细菌和酵母样菌易被仪器误报告为红细胞，小圆上皮细胞、大量细菌和非晶形结晶是引起白细胞误判的主要原因，黏液丝是引起管型误判的主要原因。讨论 多种因素可以影响尿沉渣分析仪对尿液有形成分的检测结果，因此应用 IQ-200尿沉渣分析仪检测尿液有形成分只能作为一种初步筛查方法，当尿液病理成分检测结果提示增多，同时上述干扰成分亦呈阳性或增多时，尿沉渣镜检十分重要。
【关键词】  IQ-200  尿沉渣分析仪  尿沉渣镜检  结果误判               
        前 言
        尿沉渣检查是检测尿液有形成分的主要手段，对诊断肾脏疾病的病情进展和预后判断具有极其重要的意义，也是对泌尿系统疾病做出诊断和鉴别的主要方法之一。尿沉渣检查又称尿有形成分检查，尿液有形成分检查经典的方法是在显微镜下进行人工判别。人工镜检大的问题是速度慢，在当前临床检查的尿液标本不断增加的大医院，每份尿都进行人工镜检难以做到。
        近些年，随着检验技术的飞速发展，全自动的尿沉渣分析仪逐渐在各大医院检验科中得以应用。由于全自动尿沉渣分析仪去除了繁琐的离心方法，具有操作规范化、检测的自动化、速度快、重复性好、一次可以检测多个参数等优点，被临床广泛应用。我院引进了IQ-200全自动尿沉渣分析仪，其采用数字成像和自动粒子识别（APRTM）软件来分类和定量12大类尿液有形成分。其定量报告包括：红细胞、白细胞、透明管型、病理管型、鳞状上皮细胞、非鳞状上皮细胞、细菌、结晶和精子等，可同时给出直观、清晰的各种有形成分的图像信息。但由于尿液成分的多样性、复杂性以及仪器本身检测的局限性，常导致某些检测项目存在一定程度的结果误判，即假阳性、假阴性。如果不予以及时发现和纠正将会误导临床对疾病的诊断和治疗[1]。因此，我们将IQ-200尿沉渣分析仪与显微镜镜检法的检测结果进行对比观察，统计仪器的误判率，分析IQ-200检测结果的影响因素，提出结果误判的解决对策，确定复检标准，对保证检验结果的准确性具有重要价值。
        1  材料和方法
        1.1标本来源
        标本来自苏大附二院住院患者，用一次性清洁尿杯采集晨尿共900例。
        1.2仪器与试剂
        1.2.1仪器、器材
        IRIS IQ-200全自动尿沉渣分析仪，OLYMPUS显微镜，离心机，尿沉渣离心管，玻片、盖玻片等。
        1.2.2试剂
        IQ-200使用原装试剂，阳性质控物，阴性质控物，校准物和调焦物。
        1.3 方法
        1.3.1 IQ-200检测
        IQ-200尿沉渣分析仪按仪器操作规程要求进行操作，每日工作前对IQ-200分析仪进行Focus调焦并同时运行阴性、阳性质控（仪器配套），质控后进行标本的检测（共600例），记录各有形成分的测定值。
        1.3.2显微镜检测
        取另一管尿液标本，以相对离心力400g离心5min，然后手持离心管45～90°吸弃上清液，保留0.2mL沉渣量，轻轻摇匀，用一次性滴管取1滴(20μL)置于清洁载玻片上，加盖玻片，于高倍镜下连续计数至少10个视野中红、白细胞、上皮细胞数，于低倍镜下连续计数至少20个视野中管型数，分别取其平均值，所有操作在2h内完成[2]。
        1.3.3计算、分析
        根据两种方法的测定结果，统计IQ-200检测各有形成分的假阳性率、假阴性率。对尿沉渣分析仪法与显微镜法测定结果不符的标本，再用显微镜复查尿沉渣，分析影响仪器检测尿液有形成分的影响因素，建立IQ-200复检标准。
        1.3.4 统计复检率
        另随即抽取300份住院患者的尿液标本，用IQ-200尿沉渣分析仪进行分析，根据以上所建立的复检标准，统计IQ-200检测尿液有形成分的复检率。
        2  结果
        2.1 参考值范围
        （1）IQ-200由Iris公司提供：RBC 0～17/μl，WBC 0～28/μl，透明管型 0～1/μl，鳞状上皮0～28/μl，高于此范围视为阳性。（2）尿沉渣镜检结果参照《全国临床检验操作规程》[2];RBC 0～3个/HP，WBC 0～5个/HP，管型 0～偶见/LP。阳性结果以显微镜法为标准，即IQ-200判为阳性，而镜检为阴性的则认为是假阳性，IQ-200判为阴性，而镜检为阳性的则认为是假阴性。
        2.2 IQ-200与显微镜法检测结果的对比分析
        IQ-200尿沉渣分析法和显微镜法对300例临床尿液标本尿沉渣检测结果见表1。由表1可见，IQ-200检测各有形成分存在着一定的结果误判，红细胞、白细胞、管型、上皮细胞的假阳性率分别为20.9%、11.3%、24.5%、8.2%。其中管型的假阳性率高，其次为红细胞、白细胞、上皮细胞；仪器检测的假阴性率较低，但管型的假阴性率高，容易漏检。
        表1   IQ-200尿沉渣分析仪检测结果的误判率 
         
        2.3 尿沉渣分析仪假阳性、假阴性标本的原因分析
        IQ-200、UF-1000尿沉渣分析仪假阳性、假阴性的标本，再用显微镜法复查尿沉渣，结果见表2。
        表2  IQ-200检测600例尿液标本产生假阳性、假阴性的影响因素
    

2.4 结果误判的解决对策、复核标准的建立
        IQ-200尿沉渣分析仪：（1）当仪器测定与干化学检测结果不一致时，镜检解决RBC和WBC的假阳性、管型的假阴性问题；（2）人工修饰应浏览所有图片包括NCLS库，当出现可疑成分应显微镜观察后报告；（3）对于未分类成分中有大量异形红细胞和草酸钙结晶时定量不准确，需人工镜检；（4）由于管型数量少，且受拍摄图片的有限易漏检，或者只能拍到管型的某个片段，且形态不宜辨认，因此对于所有图片中有类管型的物质必须人工镜检后报告；（5）对于所有图片中见到非鳞上皮及不能确定的成分时均应镜检；（6）对于高浓度标本，由于大量结晶、杂质的干扰导致计数不准确，应镜检后以显微镜结果报告。
        2.5 复检率
        按照以上标准，IQ-200尿沉渣分析仪的复检率为27.3%（82/300）。
        3  讨论
        目前全自动尿沉渣分析仪中美国的Yellow IRIS尿沉渣分析技术，IRIS iQ200是其新型，其主要特点是采用高速频闪光源（stroboscopic lamp）（24次/s）和电视摄像（video camera）的光学系统，每个检测标本由动力学液流进样到一个流动的标本室，在位相差显微镜下，由数码相机拍摄 500个高倍视野照片，再由计算机进行图像分析等技术，对尿中有形成分的大小、对比度、形状、质地特征进行提取，运用形态识别软件和网络技术进行有形成分的分类和定量报告。每种成分均可在荧光屏上显示其形态，并可任意选取可疑的成分进行人工复核，是一种全新的分析技术，国外文献近几年对其性能及检测结果均有较高评价[3-5]。IQ-200尿液分析仪检测时尿液无需离心，可以实现尿液分析的全自动化和标准化，具有高效、简便快速、无携带污染和结果较为准确的性能。然而，IQ-200尿沉渣分析仪仍存在一些不足。对杂质含量较少的标本其分析结果均比较准确，但对含杂质多，如结晶、非结晶型盐类多的标本，其出现假阳性的比例比较高[6]。IQ-200测定尿液有形成分时有诸多的影响因素，现分析如下:
        3.1 红细胞的检测
        IQ-200尿沉渣分析仪红细胞的假阳性通常由脱落的霉菌孢子、圆形草酸钙结晶、细菌引起。特别是尿液放置时间过久后，草酸钙结晶会呈哑铃型，其形态与RBC形态很相似，此时一定要仔细审核红细胞的分类图像。由于小圆形草酸钙结晶、脱落的霉菌孢子、细菌和酵母菌的大小、对比度及材质和RBC类似，自动微粒识别软件分析时得不到准确的信息，即使是人工审核修饰以后，由于图像清晰度的限制仍可能导致RBC的结果假阳性。IQ-200检测阴性而尿沉渣镜检阳性的标本，由于大量异形RBC会漏检到未分类成分中，而引起假阴性。
        3.2 白细胞的检测
        IQ-200检测时，肾小管上皮细胞、裸核EC、盐类结晶的析出，精子、滴虫等可造成WBC假性增高。由于白细胞与肾小管上皮细胞的大小、核物质含量相似，仪器进行荧光流式细胞分析时难以将其区分，因此会影响白细胞的检测。检测假阴性的标本可能是由于不典型WBC的存在，即使经过人工修饰仍不能辨别;此外低浓度的标本，经镜检发现有少量的白细胞团和散在的几个白细胞，由于IQ-200拍摄图片过少而造成假阴性。
        3.3 管型的检测
        由表1可知，IQ-200检测管型的假阳性率较假阴性率高。IQ-200会将尿中黏液丝、包裹的上皮细胞、类管型物质误认为管型，由于仪器对这些物质的形态大小分析不准而误认为是管型，引起假阳性。IQ-200存在管型的漏检，因为仪器拍摄的图片数量有限，对于低浓度标本含管型的数量少，受拍摄面积的局限就不一定能拍摄到管型成分，或者只能拍到管型的某个片段，人工修饰时形态不宜辨认就会漏检，所以假阴性较高，本文假阴性率达3.5%，漏检率达32.2%。
        3.4 上皮细胞的检测
        IQ-200检测上皮细胞的误判率较低，该仪器只能分类鳞状上皮与非鳞状上皮，对于异形上皮、肾小管上皮等却不能分类，由于图像不清晰导致肾小管上皮、异形上皮难以准确辨认，引起结果误判。因此在图像中见到类小圆的上皮细胞就应该对NCLS库中图像编辑审核，进行显微镜复检，以防漏检。 
        3.5 结晶的检测
        IQ-200对于结晶的检测结果的假阳可能由于杂质的存在，图像不清晰而误判为结晶；其假阴性见于少量的小圆形草酸钙结晶被分类到红细胞成分中，或者由于拍摄的图片量有限而漏检。
        综上所述，尽管IQ-200尿液分析仪能快速、准确地测定尿中的多项参数，但因尿中有形成分种类较多、形态差异，仪器自身原理的局限性，标本的采集、处理等因素均影响尿中有形成分的测定。IQ-200尿沉渣分析仪优点是能给出直观的尿液有形成分的图片，一定程度上可以取代显微镜观察，人工还能对结果进行审核修饰从而提高结果的准确性。该仪器主要不足是图像不够清晰容易导致形态的误认；只能拍摄五百张图片容易造成低浓度标本的漏检，因此管型的漏检率比较高。IQ-200除了有些结晶和霉菌容易被误认为红细胞以外，像肿瘤细胞、胱氨酸和酪氨酸结晶、脂肪滴或药物结晶以及各类管型的分型等还是需要依靠人工镜检[3-5]。多种因素可以影响尿沉渣分析仪对尿液有形成分的检测结果，因此应用 IQ-200尿沉渣分析仪检测尿液有形成分只能作为一种初步筛查方法，当尿液病理成分检测结果提示增多，同时上述干扰成分亦呈阳性或增多时，尿沉渣镜检十分重要。我们应严格执行本文提出的复检标准，从而减少误判率。目前任何自动分析仪器仍不能完全替代人工镜检。
        参 考 文 献 
        [1]姜文玲.尿液自动分析.尿沉渣及尿常规镜检对尿中有形成分的对比分析[J].中国现代医学志.2002,12(10):49-53.
        [2]叶应妩，王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3 版.南京：东南大学出版社，2006:295
        [3]Hughes C,Roebuck MJ.Evaluation of the IRIS 939 UDx flow microscope as a screening system for urinary tract infection.J Clin Pathol,2003,56:844-849.
        [4]Wah DT,Wises PK,Butch AW. Analytic performance of the iQ200 automated urine microscopy analyzer and comparison with manual counts using Fuchs-Rosenthal cell chambers.Am J Clin Pathol,2005,123:290-296.
        [5]Wargotz ES,Hyde JE,KarcherDS,et al.Urine sediment analysis by the yellow IRIS automated urinalysis workstation.Am J Clin Pathol,1987,88:746-748.
        [6]陈津,王德春,王丹,兰小鹏，朱忠勇.IRIS iQ200全自动尿沉渣分析仪与 Sysmex UF-100分析仪及人工镜检的比较和评价[J].中华检验医学杂志,2006，29（4）：374-375.转贴于 中国论文下载中心 http://www.studa.net