抗凝剂致血小板计数偏差的原因探讨

作者：李宝琴,张永珍,张丽,杨雪梅　　作者单位：050031 石家庄市，河北医科大学医院

　　【关键词】 抗凝剂,血小板聚集,血小板计数偏差

　　血小板计数的准确性是指导临床诊断和治疗的重要指标，现各大医院都采用血细胞分析仪对其计数。血细胞分析仪具有快速、精确、重复性好等优点。但有些患者在抗凝剂的影响下，血小板的数值出现较大偏差。广泛使用的是国际血液学标准化委员会(ICSH)认定的EDTA盐作为血细胞分析检测的抗凝剂。笔者从2007年1月开始，在做血细胞分析时发现某些人血小板结果出现较大偏差，用EDTA抗凝剂时血小板计数很低，换用枸橼酸钠抗凝剂时血小板计数正常。用EDTA和枸橼酸钠抗凝时血小板计数均很低，用毛细管法加到稀释液中做血细胞分析血小板计数正常，本文将观察结果报告如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 试剂

　　(1)与仪器配套的原装试剂;(2)试管:日本积水 EDTAK2抗凝试管，3.2%枸橼酸钠抗凝试管;(3)玻片，瑞士染液,血小板稀释液。

　　1.2 仪器

　　美国BECKMAN COULTER HMX五分类;美国COULTER ACT Diff 三分类。37℃水浴箱。

　　1.3 标本采集

　　顺利采出2 ml静脉血，标本采集后1 h内完成检测。

　　1.4 检测方法

　　严格按照操作步骤 充分混匀标本，上机检测，室温在23～25℃。

　　2 临床资料

　　2007年1月至2008年10月，共发现血小板计数与临床不符38例，可分3种类型，其典型病例报告如下。

　　例1.患者，女，25岁。查体做血细胞分析，正常使用EDTAK2抗凝，混匀，上机检测PLT计数很低，询问患者没有任何出血倾向，重新抽血，用3.2%枸橼酸钠抗凝，上机检测结果正常。

　　例2.患儿，男，4岁。患先天性心脏病行术前检查，做血细胞分析，用EDTAK2 管PLT结果低，换用柠檬酸钠管血小板结果仍低，用末梢血20 μl直接加到配套稀释液中，上机检测结果正常。

　　涂片瑞士染色发现：用EDTAK2与枸橼酸钠管，血小板均大量聚集在尾端，血小板计数法发现许多成堆血小板聚集。直接末梢血涂片镜检，血小板均匀分布，血小板计数均匀分布在计数盘中。

　　例3.患者，女26岁。 妊娠临产前行血细胞检查，用EDTAK2管血小板低，用枸檬酸钠管血小板也低，肉眼观察管中血液象沙粒样(冷凝集现象)。经在37℃水浴箱加温30 min，水中观察沙粒样现象消失，立即上机检测。

　　涂片瑞士染色，发现加温前血小板有大堆聚集现象，加温后血小板均匀分布在血片中。

　　3 讨论

　　EDTA作为抗凝剂，对血细胞形态和血小板计数影响很小，适用于多项血液学检查，并早已在全世界广泛应用。EDTA盐抗凝对血细胞计数影响较小，但EDTA可诱导血小板聚集黏附，可引起EDTA依赖性假性血小板减少症(PTCP)[1-3]。PTCP在临床的发生率为0.09%～0.21%。可能是因为患者血浆中存在有抗血小板抗体、抗心磷脂抗体、自身抗体等因素[4]。EDTA导致血小板聚集的原因还可能血小板表面存在某些隐匿性抗原[5，6]。

　　目前大多血细胞分析仪是根据血小板的体积大小、通过微孔时产生的脉冲数计数的。当血小板体积大或聚积成较大颗粒时，仪器只识别颗粒大小而不能识别颗粒性质，致使某些血小板被误认为小红细胞而不纳入血小板计数范围，使血小板假性减低[7]。

　　用枸橼酸钠抗凝时有时也有同样的现象。冷凝集现象是患者体内冷凝集素高，血液离体后温度低发生自凝，放到37℃水浴箱30 min后会自然散开，立即上机检测。

　　显微镜观察是确认血小板聚集的方法，大部分血细胞分析仪具有血小板聚集的警示功能，但这种提示是非特异的、不准确的。好的办法是对仪器计数血小板减少的病例，通过显微镜观察血涂片予以确认或除外;用不抗凝的毛细血管血，显微镜法计数血小板。确保把准确的检验数椐提供给临床医生，避免给患者造成不必要的恐慌和误诊。

　　【参考文献】

　　1 秦俊生，史冰洋，王晓艳，等.EDTA依赖性假性血小板减少症1例.现代检验医学杂志，2006，21：6364.

　　2 丁美桃.EDTA依赖性血小板聚集阳性者血小板计数分析.实用中西医结合临床，2005，5：16714040.

　　3 刘玉香.EDTAK引起抗静脉血血小板计数假性减少4例报道.中国民康医学杂志，2005，17：167.

　　4 王苏平.EDTA抗凝血检测血小板计数变化一例分析.现代检验医学杂志，2008，23：39.

　　5 Christopulos CG .Machin SJ .A new tvde of Pseudothrombocytopenia;EDTAmediated agglutination of platelets bearing Fab fragments of a chimaeric antibody. Br J Haematol,1994,87，650652.

　　6 Bizzaro N.EDTAdependent pseudothrombocytopenia; a clinlcal and epidemiolsical study of 112 cases 10year follow up. Am J Hemstol, 1995,50：103109.

　　7 孙杨.抗凝剂乙二胺四乙酸致血小板假性减少.检验医学与临床，2008，5：504.