钙卫蛋白在炎性疾病中的表达及临床意义

        【摘要】 炎性疾疾病作为临床常见病种，关于其诊断和治疗已成为医学研究中的一项重要任务。钙卫蛋白是一种由中性粒细胞所分泌，与炎症反应紧密相关的钙锌结合蛋白。随着近年来医学的发展，钙卫蛋白作为一种新的检测手段越来越受到重视国内外已有较多有关钙卫蛋白与炎症性肠病、肝病、自身免疫病等炎性疾病关系的报道。研究表明，钙卫蛋白与上述疾病的严重程度明显相关，并可用来预测 此类疾病的预后及复发情况。 
        【关键词】 钙卫蛋白；炎性疾病；生物标志物 
        钙卫蛋白( calprotectin)是一种来源于中性粒细 胞和巨噬细胞的含钙蛋F]，其表达具有组织或细胞 特异性，可作为急性炎性细胞活化的标志物。目前 国内关于钙卫蛋白报道甚少，但国外已有较多研究发现其与多种炎性疾病相关，并认为其具有较好的 临床应用前景。 
        1 钙卫蛋白的结构和生物学功能 钙卫蛋白是具有SIOO结构特征的蛋门质，I{i． 于1980年由Fagerh0】首先从中性粒细胞中分离m来，当时命名为L1蛋白质，后来Odink于1987年 报道钙p蛋白是与多药耐药相关蛋h(Ⅲuhidrug re-sistance associatecl protein．MRP)同族的蛋白，同时Dorin等提出钙卫蛋白是与囊悱纤维化相关的抗原。 1988‘．F Wilkinsoin等根据此种抗原的特征又将其命名为钙粒蛋白。同年A n(1erson等1证实Ll蛋白、 囊性纤维化抗原和MRP-8/14均为同一种蛋白质。 为了称呼的标准化，后来把这种具有保护性、多功 能、与钙结合的蛋白质命名为钙卫蛋白 研究发现， 钙卫蛋白是一个相对分子质量为36 000的钙锌结合蛋白。有两条链组成，轻链相对分子质量为 8 000，重链相对分子质量为14 000，两条链以共价 键相连接构成异二聚体，轻链和重链可以各自结合两个钙离子，钙卫蛋白在人体中分布广泛，在组织、细胞及体 液『fI均有表达但在不同部分其含量差异较大。它在中性粒细胞和单核细胞中含量较高一。钙卫蛋白的高度表达是中性粒细胞活化的标志一，现主 要通过测量m清中钙卫蛋白含量以及粪便钙卫蛋白含量来进行相关研究。健康人血清钙卫蛋白含量是0．I -0.6 mg/L，细菌感染时0.6 -11.0 mg/l．，病毒感染时为0.1 -11.4 mg/L。4。，粪便钙卫蛋白含量大 约足m清钙卫蛋白含量的6倍，且和性别无明显关系在一些炎症性疾病如炎性肠病( inflaⅡ，matorybowel disease，IBD)中，粪便钙卫蛋白的含量及变化幅度要大于血清钙卫蛋白。也有研究发现，农村新生儿粪便钙卫蛋白浓度要显著高于城市新生儿。 
        研究显示，钙卫蛋白作为由免疫细胞产生，同时 与炎症反应密切相关的蛋白质，具有以下生理功能： 1抑制病原微生物生长；②参与细胞内信号的传递；③提高中性粒细胞的杀菌能力，调节机体免 疫反应；④促进肿瘤细胞生长，帮助肿瘤细胞逃 避免疫监视。；⑤促进单核细胞免疫因子的分泌及 白细胞的跨内皮细胞迁移二；⑥抑制细胞的增殖并诱导其凋亡。钙卫蛋白在粪便、血浆、唾液、尿液、 脑脊液、滑膜液及结肠活检等标本中均呵被检测到， 现在测量钙卫蛋白含量的主要方法是酶联免疫吸附试验( F:fjISA)。FLISA特别适用于大样本的检测，由于EIJISA检测较为快速，儿对于实验操作者生物 危害性小，使得其成为钙卫蛋白含量检测的主要方 法。  2 钙卫蛋白和炎性疾病的关系及其临床意义由于钙卫蛋白是由Lff性粒细胞和单核细胞所产 斗的，而在炎性疾病中多有中性粒细胞和单核细胞 的浸润和激活，所以，钙卫蛋白含量的高低和炎性疾病的进展有较好的相关性_。已有研究表明，IBD患者的粪便钙卫蛋含量要明显高于健康人，并且和疾病严重程度成正相关，可用来预测疾病的预后及复发情况14 在肝病患者中，也可以检测到钙卫蛋白含量的变化一已有报道，在肝硬化病人中，其排 泄物钙卫蛋白含量要高于正常人，其含量和肝硬化患者CHILD-PUGH评分显著相关；同时在酒精导敛的肝病患者中，粪便钙卫蛋白含量的升高更加明 显。此外，钙卫蛋白在其他炎性疾病，如类风湿性关节炎、炎性胸水、龈沟炎、脑膜炎等疾病中也 具有诊断、治疗和预爪复发等十分重要的临床意义。 
        2.1 钙卫蛋白与胃肠炎胃肠炎是由病原微生物或免疫因素所致的胃 炎、小肠炎和结肠炎。临床主要表现为腹痛、腹泻、 稀水便或是粘液脓血便等，伴或不伴有发热。现在 研究较为深入的是钙卫蛋白与IBD的关系及其临床应用。IBD是一组病因未明确的慢性肠道炎症性 疾病，分为克罗恩病( Crohn，s disease，CD)和溃疡性 结肠炎( ulCerative colitis．UC)，其实质是同一发病机 理的不同临床体现。现多采用内镜、X线钡剂造影和病理活检等方法对该疾病进行诊断和预后判断新研究表明，IBD患者排泄物中钙卫蛋白含量明显高于正常人，且其含量的高低和疾病的严重程度成正相关。这使得粪便钙卫蛋白含量变化成为IBD患者的重要辅助诊断依据。同时，在器质性胃肠炎和功能性胃肠炎的鉴别诊断方面，粪便钙卫蛋 白表达水平也成为其重要依据之一，即器质性胃肠 炎患者粪便钙卫蛋白含量要高于功能性胃肠炎患 者。此外，钙卫蛋白与其他消化系统炎性疾病也密 切关联。AVdemir等。17的研究发现，在早产儿中，罹 患新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocoli-tis，NEC)的患儿其粪便钙卫蛋白含量明显增高，其增高程度和疾病的严苇程度成正相关，这提示钙卫蛋白可作为诊断NEC及判定其严重程度的标准之一。还有研究表明，在儿章感染性腹泻的诊断中，粪 便钙卫蛋白含量也成为诊断和判断其病情轻重程度的指标之一。急性放射性直肠炎是前列腺癌患者接受放疗后的常见并发症，在此类患者体内钙卫 蛋白含量也明显增高，．且其含量与放射性直肠炎的 症状成正相关，停止放疗后钙卫蛋白含量可显著降低。 
        2.2钙卫蛋白与肝脏疾病 作为肝病大国，肝脏疾病尤其是慢性肝病足严 贡影响我国公民健康的疾病之一。肝脏疾病主要分为肝炎、肝硬化、肝癌及其系列并发症，现对于肝脏疾病的诊断、监测及预后的判断丰要依赖于肝功能 以及病原学的检查。影像学在肝痫的诊断、分期和预后的判定中也有着不可替代的作用。已有研究 明，肝硬化患者粪便钙卫蛋白浓度可显著升高，其表达水平达水平与肝硬化患者Chilcl- Pugh评分显著相关，酒，酒精性肝硬化患行体内钙卫蛋表达水平升高更为明显，但其含量与患者C反应蛋白表达水平、白细胞计数和血清IL-6、IL-8和LL-IO水平无明显相关 性。同时，钙卫蛋白作为中性粒细胞的活化标记 物，已证实与酒精性肝硬化患者的不良预后关系密 切。还有研究表明，对于肝脏恶性肿瘤患者，其血清 及腹水中钙卫蛋白浓度要显著高于非恶性肿瘤患者；病毒性肝病患者血清钙卫蛋白浓度要明显低于非病毒性肝病患者；在失代偿肝硬化患者腹水及血清中钙卫蛋白浓度显著增高，且与患者死亡预后紧密相关。肝性脑病是慢性肝病患者发展到终末期，由于肝功能严重失代偿而导致的严重并发症之一，肠道的细菌移位被认为是肝性脑病产生的主要机制。有研究显示，肝硬化患者粪便钙卫蛋白浓度 要显著高于健康志愿者；在肝硬化患者中，粪便钙卫 蛋白浓度与患者Child评分和终末期肝病评分成正相关（相关系数分别为0. 577和0.303），所以检测 粪便钙卫蛋白浓度有助于快速评估肝性脑病的严重程度。 
        2.3钙卫蛋白与类风湿性关节炎类风湿性关节炎是一种病因未明的，以炎性滑膜炎为主的慢性系统性疾病，其特点是发生于手足 小关节的对称性、侵袭性关节炎，可导致关节畸形和 患者功能丧失。现在对于类风湿关节炎的监测主要依靠C反应蛋白及血沉等，已有研究表明，钙 卫蛋白水平也与类风湿性关节炎活动度密切相关，且较之传统指标，钙卫蛋白对于诊断类风湿性关节 炎更为敏感。此外，钙卫蛋白水平与类风湿因 子表达水平相关，而与循环性瓜氨酸肽段抗体滴定度无关；同时观察到钙卫蛋白浓度与类风湿性关节 炎患者关节肿胀程度相关，患者经药物治疗后钙卫 蛋白表达水平可显著降低。Cesaro等。采用抗S100A9抗体治疗类风湿性关节炎并取得良好效果，在改善患者临床症状同时减少_r免疫细胞的浸润，也明显降低了血清和关节中的炎症因子水平。抗S100A9治疗机理在于直接抑制了S100A9介导的 中性粒细胞迁移和炎性细胞因子的分泌。这项研究 结果表明，抗S100A9疗法可抑制级联免疫反应的放大，有助于保护组织和器官功能的完整性。因此，SIOOA9对于一些炎性疾病，是一个极具潜力的治疗靶点。 
        2.4钙卫蛋白与胸腔积液 胸腔积液作为临床为常见的症状之一，是很 多疾病的前兆或并发症，所以对胸腔积液良恶性的判定成为很多疾病定性诊断的重要依据。目前对于 胸腔积液较多采用的是生化检测、细胞学检测及病 原学培养等方法，尚缺少较为敏感和特异的检测手段。有研究表明，钙卫蛋白作为机体炎症反应的重 要相关蛋白，其含量的变化可间接反映胸腔积液的良恶性。Sanchez-Otero等。检测了156例诊断渗出性胸腔积液患者（其中恶性67例，良性89例）胸 腔积液中的钙卫蛋白浓度，发现恶性胸腔积液中钙 卫蛋白浓度要显著低于良性胸腔积液，其诊断恶性 肿瘤的敏感性为1 000-10，特异性为83. 15%。这提示钙卫蛋白在肿瘤诊断过程中可以作为细胞学诊断方法的良好补充。 
        2.5 钙卫蛋白与口腔炎性疾病 Becerik等。对慢性牙周炎患者、侵袭性牙周 炎患者、齿龈炎患者及健康志愿者进行分组研究 （每组各20例）后发现，钙卫蛋白在龈沟液中的含 量和患病与否紧密相关。在慢性牙周炎、侵袭性牙周炎和齿龈炎患者的龈沟液中，其钙卫蛋白含量均 显著高于健康志愿者；慢性牙周炎和侵袭性牙周炎患者龈沟液中钙卫蛋白含量无明显差别，但均高于 齿龈炎患者。Kaner等。研究了牙周探诊深度、探诊出血情况、龈沟液体积及龈沟液钙卫蛋白含量对 于广泛侵袭性牙周炎( generalized aggres-. ive peri-odonfitis，C-AgP)患者预后及复发情况的判定意义，发现只有龈沟液钙卫蛋白含量在预测G-AgP活动性方面具有重要意义。龈沟液钙卫蛋白含量增加的 患者，其G-AgP复发率亦明显增加，可作为判定G-AgP活动性的一个标志，以上研究均表明钙卫蛋白 与牙周炎性疾病关系密切，能够反映炎症的活跃程
度并可作为诊断患者牙周疾病和判定其预后及复发的标志物。 
         3结语
        钙卫蛋白是一种由中性粒细胞所分泌，与炎症反应紧密相关的钙锌结合蛋白。目前国内外已有大 量文献表明，钙卫蛋白和多种炎性疾病有着密切关 系，可作为炎性疾病诊断、预后及复发判定的标志 物，且被证实具有较好的临床相关性：但目前由于 技术L以及钙卫蛋白本身表达情况易受较多因素影 响等原因，对其含量的检测尚未大规模应用到临床 实践中，诸多炎性疾病和钙卫蛋白的内在关系还需进一步的研究论证。