新生儿遗传代谢病研究的串联质谱分析方法(非衍生化方法)

        Cliquid®新生儿遗传代谢病研究方法V1.1
        LC/MS/MS是研究代谢异常的主要工具,氨基酸和酰基肉碱类化合物的同时测定可以提供超过40个代谢异常的相关信息,如:PKU苯丙酮酸尿症和长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(MCAD)。AB SCIEX 新生儿遗传代谢病研究LC/MS/MS iMethodTM是基于流动-注射的分析方法,该法在AB SCIEX 3200和 4000系列质谱上都得到了验证。 该法通过对干血点样本直接进行氨基酸和酰基肉碱的筛查分析。方法样品前处理、工作流程简单、快捷。试验结果与衍生化法相符。
        同样采用Chromsystems干血片氨基酸和酰基肉碱分析方法包(但该 iMethodTM方法包内不含该套试剂包),该方法包含样品盘,提取和衍生试剂,缓冲液,内标物,校正物。干血点样品直接提取,然后进上清夜进行质谱检测。 
        结论
        方法采用一系列的血点质控样本进行方法验证。空白、低浓度、高浓度3个浓度的质控样品,每个浓度的质控样品平行处理5次,每个样品重复进样3次。这里列出的是低浓度目标分析物%CV值 (n=15)。
表1. 目标分析物的精密度数据

注:以上结果为一台仪器、一套标准与样品测试,结果未必适合所有仪器。因此,在实际工作前,必须使用大量的真实样品对方法进行评价。化学试剂的变化、环境、仪器性能、样品的制备过程都会影响结果。所以,结果由上述等复杂因素评价而不是特定条件。 需要的仪器
AB SCIEX 3200系列(3200 QTRAP® or API 3200TM)或者4000系列(4000 QTRAP® or API 4000TM)LC/MS/MS系统
安捷伦1100/1200 HPLC二元泵系统G1312 A,带96孔板的自动进样器以及可加热的柱温箱或 岛津HPLC系统,包括系统控制器、2个LC-20AD液相色谱泵,SIL-20AC自动进样器或CTC自动 进样器,柱温箱
Chromsystems干血片氨基酸和酰基肉碱分析方法包,该方法包含样品盘,提取和衍生试剂,缓 冲液,内标物(www. Chromsystems.com)
流动相(www. Chromsystems.com)
一个微孔板的振动器600 rpm
1/8"英寸打孔器
移液管和标准玻璃器皿 

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iMethodTM Test for Research Into Inborn Errors of me[x]tabolism Version 1.1 for Cliquid® Software 5008155