右归丸对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度、神经肽Y和血管活性肠肽的影响

我们以SD大鼠为研究对象建立绝经后骨质疏松模型，探讨右归丸对大鼠骨密度、神经肽Y和血管活性肠肽的影响。 

一、材料与方法

1．材料：清洁级SD大鼠60只，体重180~ 220 g；X线骨密度仪（Lunar Prodigy）购自美国通用公司；神经肽Y酶试剂盒购自上海纪宁实业有限公司；血管活性肠肽试剂盒购自北京雅安达生物技术有限公司。
2．绝经后骨质疏松大鼠模型制备：雌性清洁剂SD大鼠60只分为假手术组、模型组和实验组，各20只。模型组和实验组去卵巢骨质疏松大鼠模型制备：大鼠麻醉固定后，探查双侧卵巢并结扎后切除；假手术组打开大鼠腹腔后暴露双侧卵巢后逐层关闭腹腔，未行卵巢切除术：实验组大鼠切除双侧卵巢后给予右归丸灌胃3 g/kg体重=假手术组和模型组以等量生理盐水灌胃，连续12周。
3．腰椎及股骨近端骨密度测定：应用美国Lunar ProdigyX线骨密度仪，小动物分析软件enCORE( 10. 50. 086)进行扫描，测定腰椎和股骨近端的骨密度，具体操作步骤按仪器说明进行，避免不同人员操作手法对结果的影响，3组大鼠均由同一研究者进行测定。
4．大鼠骨组织神经肽Y和血管活性肠肽测定：3组大鼠处死后暴露左侧股骨近端及腰椎，截取相同部位的骨组织并称重后采用液氮冷冻后置入研钵中研磨成匀浆采用酶联免疫吸附试验试剂盒进行检测，检测方法按试剂盒说明进行操作。
5．统计学方法：应用SPSS 19.0统计软件分析，数据以均数±标准差（x+s）表示，组间比较采用方差分析，相关性分析采用Pearson相关性检验，以尸<0. 05为差异有统计学意义。
二、结果
1．各组大鼠骨密度比较：假手术、模型组和实验组用药后3个月腰椎骨密度分别为(0. 19±0.02)、(0.10±0.08)、(0.15±0. 03) g/cm2 ，差异有统计学意义（F= 15. 840，P=0.000）；3组股骨近端骨密度分别为(0. 18±0.01)、(0.11±0.09)、(0.16±0.04) g/cm2，差异有统计学意义(F=7. 960，P=O．001)。
2．神经肽Y和血管活性肠肽表达水平比较：假手术、模型组和实验组用药后3个月神经肽Y分别为(1. 34±0.12)、（1. 03士0.17）、(1. 24 +0. 16) mmol/L，差异有统计学意义(F=21. 800．P=0.000)：3组血管活性肠肽分别为(1.39±0.15)、(1. 05±0.21)、(1.26±0.23) U/L，差异有统计学意义(F=14. 780．P=0.000)。
3．骨密度与神经肽Y和血管活性肠肽相关性：实验组大鼠骨组织中神经肽Y(r=0.630，F=11. 590，P=0.003)和血管活性肠肽(r=0. 820，F=36. 600．P=0.000)与腰椎骨密度存在相关性，随着骨密度的增高，神经肽和血管活性肠肽明显增加。
三、讨论
本研究中我们采用双侧卵巢切除的方法建立去卵巢骨质疏松大鼠模型，并对实验组大鼠给予右归丸灌胃12周，结果显示实验组大鼠腰椎和股骨近端骨密度显著高于模型组，低于假手术组，提示右归丸能够提高去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度，具有抗大鼠骨质疏松作用。用药后实验组大鼠神经肽Y和血管活性肠肽显著高于模型组而低于假手术组。说明右归丸可明显提高大鼠骨组织中神经肽Y和血管活性肠肽。本研究结果显示‘，大鼠骨密度与骨组织中神经肽Y和血管活性肠肽呈正相关，提示右归丸可能通过提高骨组织中中神经肽Y和血管活性肠肽水平来达到抗骨质疏松目的。